TRPC1/C4/C5通道調(diào)節(jié)胸主動(dòng)脈平滑肌收縮作用研究
關(guān)鍵詞：大電導(dǎo)鈣激活鉀通道 瞬時(shí)受體電位通道 血管平滑肌 內(nèi)皮素1 trpc
摘要：目的研究胸主動(dòng)脈平滑肌瞬時(shí)受體電位離子通道(TRPC)家族C1/C4/C5三個(gè)亞型與大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(BK Ca)蛋白相互作用差異,闡明TRPC1/C4/C5通道在激動(dòng)劑引起的胸主動(dòng)脈平滑肌收縮中的作用。方法采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染小干擾RNA(siRNA)敲低昆明小鼠胸主動(dòng)脈平滑肌組織中TRPC1、TRPC4、TRPC5蛋白表達(dá)并用免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測其表達(dá)水平改變情況;通過離體血管實(shí)驗(yàn)檢測內(nèi)皮素1引起的血管收縮改變;采用免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)檢測TRPC1/C4/C5通道蛋白與BK Ca蛋白相互作用情況。結(jié)果瞬時(shí)轉(zhuǎn)染特異性TRPC1/C4/C5 siRNA顯著敲低昆明小鼠胸主動(dòng)脈平滑肌中TRPC1/C4/C5蛋白表達(dá);在內(nèi)皮素1引起的胸主動(dòng)脈環(huán)收縮中,TRPC1或TRPC5 siRNA處理組較對照組血管收縮顯著增強(qiáng),但TRPC4 siRNA處理組較對照組血管收縮顯著減弱;免疫共沉淀結(jié)果顯示,TRPC1可以共沉淀TRPC4、TRPC5和BKCa,同時(shí),TRPC4可以共沉淀TRPC1,TRPC5可以共沉淀TRPC1、BKCa,但TRPC4不能共沉淀BKCa。結(jié)論TRPC1可以與TRPC4或TRPC5蛋白在小鼠胸主動(dòng)脈平滑肌中組成異聚體通道,并且TRPC1-TRPC5兩種蛋白組成的異聚體通道和BK Ca形成鈣信號復(fù)合物調(diào)節(jié)血管平滑肌收縮。
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