microRNA-100對(duì)胰腺癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響及機(jī)制
關(guān)鍵詞：胰腺腫瘤 侵襲 轉(zhuǎn)移
摘要：目的：探討miR-100對(duì)胰腺癌細(xì)胞在體外侵襲和遷徙能力的影響及其機(jī)制。方法：采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶連反應(yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)miR-100在6株人胰腺癌細(xì)胞系及1株人正常胰腺上皮細(xì)胞系中的表達(dá),選取表達(dá)差異較明顯的PANC-1和MIA PaCa-2細(xì)胞系進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn);針對(duì)miR-100設(shè)計(jì)miR-100 mimic和空載體（NC）,并轉(zhuǎn)染上述兩株細(xì)胞系中,用PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率;Transwell實(shí)驗(yàn)及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-100對(duì)胰腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,免疫熒光檢測(cè)miR-100對(duì)胰腺癌細(xì)胞骨架的影響,Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞后FZD-8的表達(dá)。結(jié)果：PCR實(shí)驗(yàn)顯示miR-100在胰腺癌細(xì)胞系中低表達(dá),在正常胰腺上皮細(xì)胞系中高表達(dá),所設(shè)計(jì)的miR-100 mimic可以有效地升高PANC-1和MIA PaCa-2細(xì)胞系中miR-100的表達(dá);Transwell實(shí)驗(yàn)及劃痕實(shí)驗(yàn)顯示轉(zhuǎn)染miR-100之后,能有效的抑制胰腺癌細(xì)胞的侵襲及遷移能力（P〈0.05）;免疫熒光顯示轉(zhuǎn)染miR-100后,F-肌動(dòng)蛋白（F-actin）減少;Western blot結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染miR-100后,FZD-8的表達(dá)減少,胰腺癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯降低。結(jié)論：上調(diào)miR-100后,胰腺癌細(xì)胞可能通過(guò)下調(diào)FZD-8的表達(dá)來(lái)抑制其侵襲轉(zhuǎn)移的能力,提示miR-100有望成為胰腺癌治療的潛在靶點(diǎn)。
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