時間:2022-11-24 17:50:27
導(dǎo)言:作為寫作愛好者,不可錯過為您精心挑選的10篇七五普法實施時間,它們將為您的寫作提供全新的視角,我們衷心期待您的閱讀,并希望這些內(nèi)容能為您提供靈感和參考。
中圖分類號 P4 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739(2016)21-0194-01
隨著社會的發(fā)展與進步,氣象科技服務(wù)工作在氣象業(yè)務(wù)中占據(jù)著越來越重要的地位。近年來,濮陽市氣象科技服務(wù)發(fā)展一直堅持快速健康發(fā)展的目標(biāo),日益形成了以公眾需求為導(dǎo)向,以專業(yè)氣象業(yè)務(wù)為依托的氣象科技服務(wù)體系,為濮陽市氣象事業(yè)的不斷進步提供了有力支撐,成為創(chuàng)新與開拓庀笠滴褚約胺務(wù)領(lǐng)域的中堅力量。
1 濮陽市氣象科技服務(wù)現(xiàn)狀
1.1 不斷建立完善農(nóng)業(yè)氣象科技服務(wù)基礎(chǔ)設(shè)施
近年來,濮陽縣氣象局認(rèn)真做好“三農(nóng)”專項試點工作,根據(jù)濮陽縣高標(biāo)準(zhǔn)糧田建設(shè)和新農(nóng)村建設(shè)規(guī)劃,調(diào)整村級氣象信息服務(wù)站、氣象預(yù)警機、電子屏、田間小氣候氣象觀測站、多要素站布局,并制作了沙盤模型,建成20個鄉(xiāng)鎮(zhèn)氣象信息服務(wù)站、26個村級氣象信息服務(wù)站、6個企業(yè)(專業(yè)合作社)氣象信息服務(wù)站、4個氣象科普教育基地,共安裝電子屏(含液晶顯示屏)38塊,預(yù)警接收機146部,可視化RYQ-4型田間農(nóng)林小氣候觀測站1套、棚內(nèi)RYQ-4型田間農(nóng)林小氣候觀測儀3套、四要素站設(shè)備1套、土壤水分自動測試儀2部,氣象科普教育宣傳欄74處近800 m2,完善了濮陽市鄉(xiāng)鎮(zhèn)氣象信息服務(wù)平臺、氣象預(yù)警信息平臺。對20個鄉(xiāng)鎮(zhèn)、26個重點村及47家種植養(yǎng)殖大戶、合作社開展開展“一對一”貼身式氣象防災(zāi)減災(zāi)服務(wù),取得了良好效果[1-2]。
1.2 大力開展專題氣象科技服務(wù)
針對關(guān)鍵性事項開展專題氣象科技服務(wù)工作。一是及時制定氣象服務(wù)方案,細(xì)化服務(wù)內(nèi)容。密切監(jiān)視天氣變化,制作“三夏”期間滾動天氣預(yù)報和噴藥(肥)、夏收、夏種、晾曬等農(nóng)用天氣預(yù)報,提出針對性農(nóng)事生產(chǎn)建議,服務(wù)“三夏”生產(chǎn)。二是充分利用電視、廣播、12121電話、手機短信、電子顯示屏、預(yù)警大喇叭、互聯(lián)網(wǎng)等及時為政府、有關(guān)部門和農(nóng)民群眾開展專題服務(wù)。三是加強大風(fēng)倒伏、干熱風(fēng)、冰雹、暴雨等災(zāi)害性天氣跟蹤監(jiān)測,及時制作并氣象災(zāi)害預(yù)警信息,指導(dǎo)農(nóng)民采取有效措施。四是利用衛(wèi)星遙感技術(shù),做好秸稈焚燒火點監(jiān)測工作,確保禁燒工作圓滿完成。五是做好麥?zhǔn)涨捌诓∠x害防御工作,做好病蟲害防御[3-4]。
1.3 加強全市危化品防雷安全檢查工作
定期檢查全市油庫、氣庫、彈藥庫、化學(xué)品倉庫、煙花爆竹、石化等易燃易爆建設(shè)工程和場所的防雷年度檢測情況。檢查全市?;贩览啄甓葯z測、防雷安全大排查和防雷安全管理、防雷安全隱患整治落實等是否到位,以及各縣區(qū)防雷監(jiān)管部門是否依法履職盡責(zé)到位。
2 濮陽市氣象科技服務(wù)存在的不足
雖然近年來濮陽市氣象科技服務(wù)工作取得了一定的成績,但是還存在諸多不足之處:社會公眾缺乏氣象科技知識,氣象科技服務(wù)體制不健全,導(dǎo)致工作職責(zé)分工不明確;氣象科技服務(wù)產(chǎn)品科技含量不高,很少拓展新領(lǐng)域、開發(fā)新項目,缺乏氣象科技服務(wù)人才,尤其氣象信息產(chǎn)品開發(fā)、經(jīng)營策劃與營銷人才還不足,影響著氣象科技服務(wù)的快速發(fā)展。
3 濮陽市氣象科技服務(wù)工作的發(fā)展建議
3.1 加強氣象科普知識的宣傳,提高公眾氣象知識水平
要定期開展氣象科普知識宣傳工作,建立氣象科普基地,加大公眾對氣象知識的了解,認(rèn)識天氣預(yù)報產(chǎn)品種類及災(zāi)害性天氣預(yù)警信號標(biāo)志,學(xué)會根據(jù)災(zāi)害嚴(yán)重程度等采取對策,減少或避免氣象災(zāi)害導(dǎo)致的生命財產(chǎn)損失。
3.2 做好氣象科技服務(wù)的調(diào)研工作
氣象部門要深入農(nóng)業(yè)、工業(yè)、林業(yè)、交通等行業(yè)開展氣象調(diào)研工作,了解當(dāng)?shù)貙庀罂萍挤?wù)的具體需求;加大科技資金投入,加強人工影響天氣工作、氣象科技等研發(fā)工作,同時對各類氣象信息進行深加工,開發(fā)滿足社會公眾要求的氣象科技服務(wù)產(chǎn)品,提高氣象科技服務(wù)產(chǎn)品科技含量。
3.3 加強氣象科技服務(wù)的管理
建立完善氣象科技服務(wù)管理機制,制定科學(xué)合理的氣象科技服務(wù)發(fā)展措施,逐步形成“界面清晰、責(zé)權(quán)明確、管理規(guī)范、監(jiān)督有效、成效顯著”的氣象科技服務(wù)管理體系,制定出科學(xué)有效的氣象科技服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)化實施方案,不斷提高氣象科服務(wù)工作的標(biāo)準(zhǔn)化以及規(guī)范化水平。
3.4 加強氣象預(yù)報預(yù)警系統(tǒng)的建設(shè)
加強氣象科技服務(wù)信息制作平臺的建設(shè),主要包括天氣實況及監(jiān)測分析評估服務(wù)系統(tǒng)、決策氣象服務(wù)系統(tǒng);完善氣象科技服務(wù)信息系統(tǒng)及氣象預(yù)報預(yù)警平臺建設(shè)。主要包括氣候預(yù)測業(yè)務(wù)系統(tǒng)以及災(zāi)害性天氣預(yù)報業(yè)務(wù)系統(tǒng)等,全面提高天氣預(yù)報預(yù)警水平。
3.5 加強氣象科技服務(wù)隊伍的建設(shè)
建立有效的人才隊伍建設(shè)機制,采取外引內(nèi)培方式,引進氣象科技專業(yè)人才,補充到氣象科技服務(wù)隊伍中,并定期對氣象科技服務(wù)人員開展培訓(xùn),為氣象科技服務(wù)的發(fā)展提供強有力的人才保障。
4 結(jié)語
濮陽市氣象部門須高度重視氣象科技服務(wù)工作,建立完善相關(guān)制度,加強氣象科技服務(wù)隊伍的建設(shè),不斷創(chuàng)新服務(wù)方式,開發(fā)研制出氣象科技服務(wù)新產(chǎn)品,以更好滿足社會公眾的需求,從而進一步推動氣象科技服務(wù)的可持續(xù)發(fā)展。
5 參考文獻
[1] 賴虹,周N,王麗平,等.贛州氣象科技服務(wù)現(xiàn)狀及發(fā)展建議[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2012(9):38.
中圖分類號:O657.63 文獻標(biāo)識碼:A
孔雀石綠(Malachite green,MG) 化學(xué)式為C23H25N2Cl,相對分子質(zhì)量為364.92,曾在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用來預(yù)防和治療受精卵和成魚的水霉病、腮霉病和小瓜蟲病等,以及用于活魚運輸、池塘?xí)吼B(yǎng)過程和環(huán)境的消毒[1~2]。自從20世紀(jì)80年現(xiàn)孔雀石綠具有潛在的致癌性,美國、日本以及英國等許多國家已禁止其用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。我國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY5071—2002《無公害食品漁用藥物使用準(zhǔn)則》中已將孔雀石綠列為禁用藥物。雖然MG 在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的違禁使用情況越來越少,但由于其曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用,已對環(huán)境造成了嚴(yán)重污染,水產(chǎn)品中被查出含有MG 的事件也時有發(fā)生。水體中存在的痕量MG 有可能引起了水產(chǎn)品的二次污染[3~5],因此建立水體中MG及其代謝物L(fēng)MG的檢測方法是很有必要的。
1 實驗部分
1.1 主要儀器設(shè)備和試劑
Acquity UPLC-XEVO TQ MS型超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(美國Waters公司);A120S型萬分之一天平(德國Sartorius公司)。
孔雀石綠(MG)和隱性孔雀石綠(LMG)標(biāo)準(zhǔn)品均購自德國Dr. Ehrenstorfer公司;乙腈、甲醇、甲酸均為色譜純(美國Fisher公司);乙酸銨為優(yōu)級純(天津科密歐);Oasis MCX固相萃取小柱( 美國Waters 公司,150 mg/6mL);實驗用水為美國Milli-Q去離子水發(fā)生器制備的高純水。
1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
準(zhǔn)確稱取孔雀石綠(MG) 和隱性孔雀石綠(LMG)標(biāo)準(zhǔn)品適量,用乙腈溶解,配制成質(zhì)量濃度為100μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液,根據(jù)需要用流動相將混合中間標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋成濃度為0.25μg/L、0.50μg/L、1.00μg/L、2.00μg/L、5.00μg/L、10.00μg/L、25.00μg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,現(xiàn)用現(xiàn)配。
1.3 儀器分析條件
1.3.1 液相色譜條件
色譜柱:Waters BEH C18(1.7 ?m,50mm×2.1mm);柱溫:30℃;流速:0.5mL/min;進樣量:10?L;流動相A:乙腈;流動相B:含0. 1%甲酸的5mmol/L的乙酸銨水溶液。梯度洗脫程序:0~1.0min,10% A~60% A;1. 0~3. 0min,60%~100% A;3.0 ~4.0min,100%A,4 ~4.1min,100% A~10% A,4.1~5.0min 10% A。
1.3.2 質(zhì)譜條件
離子源:電噴霧離子源(ESI+);掃描方式:正離子掃描;檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);毛細(xì)管電壓:3.2kV;離子源溫度:150℃;去溶劑氣溫度:500℃;去溶劑氣流量:1000L/h;定性、定量離子對及碰撞能量見表1。
1.4 樣品處理
1.4.1 水樣采集
分別從水面表層、水面下約0.5m 、水面下約1.5m處采集養(yǎng)殖區(qū)池塘水,水樣采集后,混合均勻,24h內(nèi)測定。
1.4.2 水樣凈化
準(zhǔn)確量取25mL待測水樣,過0.45?m水系濾膜除去固體懸浮物后轉(zhuǎn)入100mL錐形瓶中,加入0.5mL甲酸使水樣甲酸體積分?jǐn)?shù)為1%,搖勻。將酸化后的水樣全部通過已活化好的MCX固相萃取小柱(使用前用5mL甲醇、5mL水活化),待水樣全部過完后,依次用3mL 2%(V/V)甲酸、3mL水、3mL甲醇淋洗,棄去淋洗液。真空抽干后,用5mL乙酸乙酯-甲醇-氨水(體積比為50:45:5)洗脫進行洗脫,收集洗脫液于40℃條件下用氮氣吹干,用初始流動相定容至1.0mL,過0.22?m有機系濾膜后,上機進行分析檢測。
2 結(jié)果與討論
2.1 色譜和質(zhì)譜條件的優(yōu)化
MG和LMG屬于三苯基甲烷類化合物,具有弱堿性,因此選擇ESI正離子模式,加入0.1%的甲酸有助于目標(biāo)物離子化。色譜條件摸索中發(fā)現(xiàn),只加入0.1%甲酸MG和LMG的保留時間非常接近(分別為1.34min、1.42min),加入5mmol/L的乙酸銨后,LMG保留時間延長為2.17min,同時LMG離子響應(yīng)強度也有所增強,因此本實驗選用含0. 1%甲酸的5mmol /L 乙酸銨水溶液和乙腈作為流動相進行梯度洗脫。
2.2 方法的線性關(guān)系與檢出限
按照1.2節(jié)標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法,配制系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進行測定,取其峰面積(Y)與濃度(X)作線性回歸,線性關(guān)系和相關(guān)系數(shù)見表2。在本法測定條件下,采用3倍信噪比(S/N=3)計算水體中MG和LMG的檢出限均為0.01μg/L。
表2 MG和LMG標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系和相關(guān)系數(shù)
名稱 線性范圍/(μg/L) 線性方程 相關(guān)系數(shù)r
MG
LMG 0.25~25
0.25~25 Y =3581.3X + 5.138
Y =2356.7X + 8.365 0.9990
0.9993
2.3 方法的回收率與精密度
采用在空白樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法,在采集的水樣中添加一定體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液,使水樣中MG和LMG含量分別達到0.02μg/L、0.1μg/L、0.5μg/L 3個濃度梯度,每個梯度進行6次重復(fù)試驗,按照本方法處理后進行測定。結(jié)果表明,MG和LMG 3個濃度梯度的回收率為80.6%~92.7%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.29%~8.23%。因此,MG 和LMG在水體中的加標(biāo)回收率相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均能達到檢測要求,說明本方法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。
3 結(jié)語
本文建立了超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測水體中孔雀石綠(MG)和隱性孔雀石綠(LMG)殘留量的方法。該方法具有選擇性高、步驟簡單、分析快速的特點,檢出限低、回收率高、精密度良好,可作為環(huán)境水體中痕量孔雀石綠(MG)和隱性孔雀石綠(LMG)殘留量檢測的參考方法。
參考文獻
[1] 楊金蘭,陳培基,黎智廣,等.高效液相色譜法測定水產(chǎn)品孔雀石綠殘留量的優(yōu)化研究[J].南方水產(chǎn),2010,6(04):43-48.
[2] Safark I,Safarikova M. Detection of low concentrations of malachitegreen and crystal violet in water[J]. Water research,2008(36):196-200.
1引言
芥子氣(HD)是一種糜爛性化學(xué)毒劑,化學(xué)名為2,2′二氯二乙硫醚,可通過吸入、皮膚和眼睛暴露等方式中毒,造成皮膚、眼睛、呼吸道等出現(xiàn)不同程度的損傷[1,2\]。兩次世界大戰(zhàn)以及80年代爆發(fā)的兩伊戰(zhàn)爭中都使用了大量HD,造成了大量軍民傷亡[3~5\]。侵華日軍戰(zhàn)敗后在中國境內(nèi)遺棄了大量包括芥子氣在內(nèi)的化學(xué)毒劑,長期以來對環(huán)境以及附民都造成了嚴(yán)重危害[6,7\]。1997年OPCW并生效的《化學(xué)武器公約》(CWC)嚴(yán)格禁止了HD的生產(chǎn)、儲存和使用,但至今其銷毀工作還未完成;同時由于HD容易生產(chǎn)、性質(zhì)穩(wěn)定,一旦被不法分子利用,還會極大地威脅公共安全。因此,有必要發(fā)展并建立靈敏、可靠的分析方法對HD染毒樣品進行準(zhǔn)確鑒定,對違約使用的調(diào)查取證、染毒人員的診斷救治都具有重要意義[8\]。
HD含有兩個親電中心,進入生物體后迅速分布于各組織中,發(fā)生代謝反應(yīng)可能生成水解氧化產(chǎn)物、β裂解產(chǎn)物和大分子加合物等一系列化合物[9,10\]。這些代謝物按照其來源及特點分為兩類:小分子游離代謝物和大分子加合代謝物[11~13\]。小分子游離代謝物包括硫二甘醇(TDG)、硫二甘醇亞砜(TDGO)及芥子氣亞砜(SMO)等水解、氧化產(chǎn)物,以及與谷胱甘肽加合后經(jīng)β裂解酶作用產(chǎn)生的1,1′磺?;p\[2(甲基亞磺?;┮彝椋躚(SBMSE),1甲基亞磺?;?\[2(甲硫基)乙基磺酰基\]乙烷(MSMTESE),1,1′磺?;p\[2S(N乙酰半胱氨?;┮彝椋躚(SBSNAE)等β裂解產(chǎn)物(如圖1所示)。在小分子代謝物中,雖然文獻\[5\]報道了在生物體內(nèi)檢測出痕量的內(nèi)源性TDG和TDGO,但在HD染毒的生物醫(yī)學(xué)樣品中,TDG與TDGO的濃度顯著升高,而且這些化合物均具有HD的結(jié)構(gòu)特征,因此,這些小分子代謝物均可作為HD生物標(biāo)識物[11\]。與大分子加合物相比,小分子標(biāo)識物在芥子氣暴露后很快出現(xiàn)在體液中,能夠在體內(nèi)存在數(shù)日至兩周,并且具有檢測快速的優(yōu)點,是染毒早期快速診斷的理想標(biāo)識物。
對于HD小分子標(biāo)識物的分析,大多采用GCMS/MS或LCMS/MS等技術(shù)分析其衍生產(chǎn)物或原體[14~17\],但由于不同標(biāo)識物的性質(zhì)差異,這些報道大都只針對單個或兩個標(biāo)識物進行分析。但HD染毒劑量、方式以及染毒時間的不同所產(chǎn)生的生物標(biāo)識物也不盡相同[16\],因此,所建立的方法應(yīng)能更廣泛用于標(biāo)識物和樣品的分析。直到2013年,Li等[18\]報道了將血漿蛋白沉淀后直接進行LCMS/MS的分析方法,可同時檢測7種HD游離代謝物。方法制備簡單、耗時短,取得了較好的結(jié)果。但該方法中血漿經(jīng)蛋白經(jīng)沉淀直接分析,基質(zhì)依然復(fù)雜,背景中存在大量干擾峰,分析大量樣品后會造成色譜柱壓升高、響應(yīng)降低、儀器穩(wěn)定性變差等問題。
針對以上情況,本研究引入SPE制備方法,并優(yōu)化了UHPLC的梯度洗脫程序,建立了血漿中6種HD標(biāo)識物(TDGO,SBMSE,SBSNAE,TDG,MSMTESE和SMO)的UHPLCMS/MS定量分析方法。實驗結(jié)果表明,本方靈敏度高、選擇性好、樣品基質(zhì)純凈,大批量樣品分析響應(yīng)穩(wěn)定、重復(fù)性好。JP
2實驗部分
2.1儀器、材料及試劑
1290超高效液相色譜系統(tǒng)(美國Agilent公司);6460型三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)(美國Agilent公司);Centrifuge5424型高速離心機(德國Eppendorf公司);NEVAP111型氮氣吹干儀(美國OrganomationAssociates公司)。
HD、TDG、TDGO、SMO、SBMSE、MSMTESE及SBSNAE(均由本單位合成,NMR分析純度>95%);HLB固相萃取柱(500mg/6mL,美國Waters公司);水、甲醇、乙腈(色譜純,美國Honeywell公司);甲酸銨(美國RoeScientific公司);健康人血漿部分由北京紅十字中心提供,部分來自于本實驗室的自愿者。JP
2.2安全措施
所有涉及到芥子氣的操作,如取用、配制和染毒過程均需要佩戴相應(yīng)的防護器材,并在通風(fēng)良好的狀況下進行;以NaOH乙醇(1KG-3∶KG-510~1KG-3∶KG-511,V/V)混合溶液作為洗消劑,各種直接接觸芥子氣的實驗器材在使用后立即洗消。
2.3染毒及加標(biāo)血漿的制備
用乙腈配制1.0mg/mLHD標(biāo)準(zhǔn)工作液,吸取4.0μL標(biāo)準(zhǔn)工作液,加入4.0mL空白血漿,混勻、37℃振蕩反應(yīng)12h,得到1.0μg/mLHD染毒血漿儲備液。用純水配制6種HD標(biāo)識物的混合標(biāo)準(zhǔn)液,各標(biāo)識物濃度均為100μg/mL,用空白血漿稀釋為0.01~500ng/mL的加標(biāo)血漿。以上儲備液均于
20℃保存。
2.4樣品制備
參照文獻\[18\]方法對血漿樣品進行蛋白沉淀。0.5mL血漿中加入2.0mL乙腈甲醇(4KG-3∶KG-51,V/V),渦旋混勻,6100r/min離心5min,移取上清液。向沉淀中繼續(xù)加入1.0mL乙腈甲醇(4KG-3∶KG-51,V/V),渦旋混勻、12200r/min離心5min,將兩次的上清液合并,氮氣吹干,1.0mL純水復(fù)溶,離心收集上清液,加入60μL1.4%氨水準(zhǔn)備進行SPE。
先后用5mL甲醇、12mL水和5mL1.4%氨水平衡HLB柱;上樣,分別用3mL1.4%氨水和2mL2%甲醇1.4%氨水淋洗;最后用4mL含2%甲酸甲醇進行洗脫;濃縮洗脫液至近干,加入0.15mL純水復(fù)溶,離心后取上清液進行LCMS分析。
2.5液相色譜質(zhì)譜分析條件
色譜條件:ZorbaxEclipsePlusC18色譜柱(100mm×2.1mm,1.8μm,美國Agilent公司);流動相A為5mmol/L甲酸銨溶液,B為含5mmol/L甲酸銨的甲醇溶液;洗脫梯度:0~2.5min,5%~10%B;2.5~5.0min,10%~100%B;5.0~8.0min,100%B;8.0~8.1min,100%~5%B,運行3min;流速0.3mL/min;柱溫40℃;進樣體積10μL。
質(zhì)譜條件:在ESI+模式下采用MRM方式掃描,應(yīng)用4個時間段掃描6個目標(biāo)物的定量及定性離子對,0~1.75min掃描SBSME和TDGO;1.75~3.60min掃描SBSNAE和TDG;3.60~4.65min內(nèi)掃描MSMTESE;4.65min后掃描SMO。毛細(xì)管電壓4.0kV,離子源溫度350℃;霧化氣壓力35psi;碰撞加速電壓3V,權(quán)重為1/x。其它參數(shù)見表1。
3結(jié)果與討論
3.1固相萃取條件的選擇
與文獻\[18\]相比,針對血漿基質(zhì)的復(fù)雜性,增加了固相萃取步驟,目標(biāo)是進一步除去基質(zhì)中的背景干擾物,使制備后的樣品更加純凈,提高檢測靈敏度和定量穩(wěn)定性。6種化合物的極性順序為TDGO>SBMSE>SBSNAE>TDG>MSMTESE>SMO,其中TDGO與SBMSE,SBSNAE與TDG,MSMTESE與SMO的極性相近,因此,選擇3種化合物SBMSE、TDG和MSMTESE進行血漿加標(biāo)(濃度均為10ng/mL),考察了BondElutePlexa(60mg,3mL),SampliQPSDVB(500mg,6mL),HLB(500mg,6mL),以及HLB(60mg,3mL)JP4種SPE柱的富集效果,結(jié)果見圖2。
BondElutePlexa柱的填料為疏水性的二乙烯及苯基聚合物,主要用于富集弱極性化合物,而SBMSE及TDG等目標(biāo)物的極性相對較強,因此回收率低。而PSDVB柱的填料為聚苯乙烯二乙烯基苯共聚物,適用于從水溶液中提取極性芳香化合物,如苯酚等,不適于本文目標(biāo)物的富集。HLB采用二乙烯苯和N乙烯基吡咯烷酮的親水親脂兩性填料,可富集的化合物極性范圍更寬。此外,還考察了60mg小柱床的HLB柱,以期在不損失回收率的情況下,減少背景干擾,但實驗結(jié)果表明60mg的SPE柱的容量有限,回收率偏低,不適于0.5mL血漿樣品的富集。因此,經(jīng)比較,本實驗最終選擇回收率最高的HLB(500mg/6mL)柱對6種HD標(biāo)識物的加標(biāo)樣品進行SPE純化。
目標(biāo)化合物都顯弱堿性,加入60μL1.4%氨水,目的是降低目標(biāo)化合物的極性,增強與HLB柱填料疏水基團的結(jié)合。經(jīng)過比較考察,最終選擇先用3.0mL1.4%氨水淋洗殘留在柱上的雜質(zhì),再用2.0mL含1.4%氨水的2%甲醇淋洗柱子上非特異性結(jié)合的極性干擾物。此外,向洗脫液中添加2%甲酸是為了降低目標(biāo)物在HLB柱上的結(jié)合力,使其更容易被洗脫。實驗結(jié)果表明,SPE在有效富集目標(biāo)物的同時,除去了血漿基質(zhì)中的大量背景干擾,色譜圖基線干凈(圖3),延長了色譜柱的使用壽命。
3.2UHPLCMS/MS方法的優(yōu)化
根據(jù)6種化合物的理化性質(zhì)及三重四極桿質(zhì)譜的特點,在ESI+模式下應(yīng)用Masshunteroptimizer件對每一個目標(biāo)化合物的分析參數(shù)進行優(yōu)化,結(jié)果見表1。為了在較短時間內(nèi)獲得良好的分離效果,對洗脫程序進行優(yōu)化。由于TDGO和SBMSE這兩種化合物極性很強,所以在前2.5min內(nèi)沒有采用等度平衡程序,目的是將目標(biāo)物與基質(zhì)中的強極性背景化合物進行分離,減少干擾;MSMTESE和SMO在色譜柱上保留較好,為了縮短分析時間,采用快速梯度洗脫程序?qū)δ繕?biāo)物進行洗脫。在優(yōu)化的洗脫條件下,6種HD標(biāo)識物在6min內(nèi)均有較好的分離(圖3),TDG和SBSNAE的保留時間重合,可通過MRM離子對m/z的差異進行區(qū)分。此外,本研究采用4個時間段同時分析6個HD代謝物的12個MRM離子對,使每個峰能獲得定量分析所需的足夠掃描點數(shù),改善峰形和靈敏度。
3.3方法學(xué)考察
3.3.1專屬性在最佳色譜質(zhì)譜條件下,測試溶劑空白(純水)、空白血漿、加標(biāo)血漿(6種標(biāo)識物濃度均為50ng/mL)和HD染毒血漿(100ng/mL)樣品。溶劑空白中未檢出任何相關(guān)化合物(圖4A),表明儀器系統(tǒng)中沒有相關(guān)背景干擾??瞻籽獫{中僅檢測到少量內(nèi)源性TDGO和TDG(圖4B),濃度分別為2~8ng/mL和0~5ng/mL,與文獻[5]報道一致。50ng/mL加標(biāo)血漿樣品中6種化合物的響應(yīng)良好(圖5A)。在100ng/mLHD染毒血漿中發(fā)現(xiàn)了顯著高于空白血漿的TDGO和TDG,可以作為HD染毒依據(jù)(圖5B)。在體外染毒血漿樣品中沒有檢測到SMO的原因是在低濃度染毒時HD主要發(fā)生水解反應(yīng),自身氧化反應(yīng)很少[8\]。β裂解產(chǎn)物是由HD與谷胱甘肽的加合物在β裂解酶的作用下而生成,但谷胱甘肽主要存在于血細(xì)胞中,離心后的血漿中谷胱甘肽含量極少,所以未檢測到。但是,在真實染毒患者體內(nèi),HD既可能發(fā)生水解、氧化反應(yīng),還可能與血液中的谷胱甘肽充分反應(yīng)后釋放出β裂解產(chǎn)物,染毒人員血液經(jīng)離心得到的血漿中可能存在水解氧化及β裂解標(biāo)識物[18\]。因此,本方法依然可應(yīng)用于真實HD染毒患者體內(nèi)代謝后的血漿樣品分析。4種樣品的MRM色譜圖比較結(jié)果顯示,空白血漿中除低水平的TDGO和TDG內(nèi)源性本底外,無其它干擾物,表明本方法專屬性較好。
3.3.2線性范圍、方法檢出限及定量限為了降低基質(zhì)效應(yīng)對檢測準(zhǔn)確度的影響,本研究采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法進行定量分析。將濃度為0.01~500ng/mL的加標(biāo)血漿按照2.4和2.5節(jié)進行處理分析。以目標(biāo)物的濃度和峰面積進行線性回歸,權(quán)重為1/x,繪制定量標(biāo)準(zhǔn)曲線。以響應(yīng)顯著高于空白血漿且信噪比為3對應(yīng)的濃度作為方法的檢出限(LOD),信噪比為5且相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)低于20%所對應(yīng)的濃度作為方法的定量限(LOQ)[18\],結(jié)果見表2。6種目標(biāo)物均有較寬的線性范圍,SBMSE、SBSNAE和MSMTESE的檢出限與文獻\[18\]報道一致,而SMO、TDG與TDGO的靈敏度比文獻值提高了5~10倍(表3)。
3.3.3加標(biāo)回收率與精密度對5,150和450ng/mL的加標(biāo)血漿質(zhì)量控制樣品(LQC,MQC和HQC)進行平行處理并分析,每個樣品重復(fù)測定5次。計算各目標(biāo)化合物的精密度和回收率,結(jié)果見表4。6種化合物的回收率在86.5%以上,RSD
3.4HD染毒樣品分析
CM(42OPCW在2015年第5次生物醫(yī)學(xué)樣品分析演練中提供了6份懷疑HD中毒人員的血漿樣品CM)LM
(A~F),和1份空白血漿(M)。采用所建方法對所ZH(有
樣品進行定性及定量分析,檢測結(jié)果見圖6。在C樣品中檢測到的TDG及TDGO與血漿基質(zhì)M一致,所以確定C樣品為空白血漿;在A,B,D,E和F樣品中都檢測到高于內(nèi)源水平的TDG與TDGO,根據(jù)檢測得到TDG與TDGO的含量大小,得出樣品染毒濃度順序為F>A>E>D>B。OPCW的結(jié)果中C為空白血漿,A,B,D,E和F分別為100,10,40,50和150ng/mLHD染毒血漿,說明本方法的CM(21*3/4檢測結(jié)果與OPCW官方提供的染毒信息一致??誄M)ZH)
白血漿中內(nèi)源TDG與TDGO的分析結(jié)果表明,HD對血漿的染毒濃度在10ng/mL以上時,可利用TDG和TDGO作為標(biāo)識物進行HD的溯源性分析,而之前未有此方面報道。另外有意義的是,本方法檢測到的TDG與TDGO的濃度和與HD染毒濃度(10~150ng/mL,OPCW提供)呈良好的線性關(guān)系,這使得依據(jù)檢測染毒血漿樣品中標(biāo)識物的濃度檢測實際HD染毒濃度成為可能,但由于代謝物的濃度還與染毒時間密切相關(guān),特別是在體內(nèi)染毒情況下,因此,代謝標(biāo)識物與染毒濃度之間的關(guān)系還需要進行深入探討。
References
1(#GhabiliK,AgutterPS,GhaneiM,AnsarinK,PanahiY,ShojaMM.Crit.RevToxicol.,2011,(41):384-403
2KeheK,SziniczL.Toxicology,2005,(214):198-209
3KeheK,ThiermannH,BalszuweitF,EyerF,SteinritzD,ZilkerT.Toxicology,2009,263(1):3-8
4LawrenceRJ,SmithJR,BoydBL,CapacioBR.J.Anal.Toxicol.,2008,(32):31-36
5ZhangY,YueL,NieZ,ChenJ,GuoL,WuB,F(xiàn)engJ,LiuQ,XieJ.J.Chromatogr.B,2014,(961):29-35
6HuaX,ZhiYN,ZhangYJ,LiCZ,YueLJ,YangWF,ChenJ,DongY,LiQ,LinY,WuBD,F(xiàn)engJL,LiH,GuoL,XieJW.Toxicol.Rep.,2014,(1):533-543
7DavisKG,AsperaG.Ann.Emerg.Med.,2001,(37):653-656
8RuffAL,DillmanJF.Eplasty,2007,(8):e2
9AndachtTM,PantazidesBG,CrowBS,F(xiàn)idderA,NoortD,ThomasJD,BlakeTA,JohnsonRC.J.Anal.Toxicol,2014,(38):8-15
10PantazidesBG,CrowBS,GartonJW,QuionesGonzlezJA,BlakeTA,ThomasJD,JohnsonRC.Chem.Res.Toxicol.,2015,28(2):256-261
11NieZ,LiuQ,XieJ.Talanta,2011,85(2):1154-1159
12LinY,DongY,ChenJ,LiCZ,NieZY,GuoL,LiuQ,XieJW.J.Chromatogr.B,2014,,15(945946):233-239
13WeiY,YueL,LiuQ,ChenJ,XieJ.J.Chromatogr.B,2011,(879):1707-1712
14RichesJ,ReadRW,BlackRM.J.Chromatogr.B,2007,(845):114-120
15LIChunZheng,CHENJia,ZHONGYuHuan,ZHONGYuXu,XIEJianWei,LIHua.ChineseJ.Anal.Chem.,2012,40(10):1567-1572
李春正,佳,鐘玉環(huán),鐘玉緒,謝劍煒,李樺.HTK分析化學(xué),2012,40(10):1567-1572
16BoyerAE,AshD,BarrDB,YoungCL,DriskellWJ,WhiteheadRDJr,OspinaM,PrestonKE,WoolfittAR,MartinezRA,SilksLA,BarrJR.J.Anal.Toxicol.,2004,28(5):327-332
17NIEZhiYong,ZHANGYaJiao,WUBiDong,YANLong,F(xiàn)ENGJianLin,LIUQin,XIEJianWei.ChineseJ.Anal.Chem.,2014,42(7):980-984
志勇,張雅姣,吳弼東,閆瓏,馮建林,劉勤,謝劍煒.HTK分析化學(xué),2014,42(7):980-984
18LiC,ChenJ,LiuQ,XieJ,LiH.J.Chromatogr.B,2013,917918:100-107)
、
1 引 言
在發(fā)酵業(yè)中,葡萄糖作為發(fā)酵液的主要碳源,其用量直接影響產(chǎn)品質(zhì)量,所以對發(fā)酵液中葡萄糖濃度的檢測是十分必要的[1]。酶類生物傳感器的諸多優(yōu)點使其廣泛應(yīng)用于發(fā)酵過程中葡萄糖濃度的檢測。葡萄糖生物傳感器多為固定化酶電極[2~4],由于發(fā)酵工藝的高溫蒸汽滅菌過程使固定化酶生物傳感器無法在線使用。本研究組在前期研究中提出了一種用“酶液”代替固定態(tài)“酶膜”的方法,并研制出采用酶注射結(jié)構(gòu)的葡萄糖生物傳感器,可基本滿足實際需求,但是還存在檢測時間過長的問題[5,6]。2015年,本研究組對此類生物傳感器進行機理建模,建立了酶注射式葡萄糖生物傳感器的機理模型,此模型表述了整個反應(yīng)的機理,同時也對檢測方法提供了機理模型[7],為改進檢測算法、降低檢測時間提供了理論基礎(chǔ)。
酶注射式生物傳感器主要針對發(fā)酵領(lǐng)域中葡萄糖濃度的檢測,其檢測步驟為:首先利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液進行標(biāo)定,再對發(fā)酵液中的葡萄糖濃度進行檢測。但是生物傳感器易受溫度影響[8~10],在實際測量時,由于發(fā)酵液的溫度是變化的,且通常與室溫狀態(tài)下的標(biāo)定液溫度不同,導(dǎo)致標(biāo)定結(jié)果不準(zhǔn)確,從而使測量結(jié)果產(chǎn)生誤差。而且每次測量都需要標(biāo)定,不僅操作繁瑣,而且也不利于實現(xiàn)在線檢測。
本研究主要針對酶注射式葡萄糖生物傳感器在實際使用中因為標(biāo)定液與被測液的溫度不同而引起的測量結(jié)果不準(zhǔn)確問題,利用熱力學(xué)與酶促反應(yīng)動力學(xué)提出一種新的檢測方法。首先利用動力學(xué)建立酶注射式葡萄糖生物傳感器濃度檢測機理模型,再利用阿倫尼烏斯公式建立溫度與動力學(xué)模型中未知參數(shù)之間的關(guān)系,并將此關(guān)系代入該模型中建立基于溫度的濃度檢測新模型,根據(jù)實驗數(shù)據(jù)通過數(shù)據(jù)擬合確定了基于溫度的濃度檢測模型中的參數(shù)值,得到檢測新模型。利用新模型提出了一種以反應(yīng)混合液的溫度和反應(yīng)初始電流斜率推導(dǎo)葡萄糖濃度的檢測方法。分別利用動力學(xué)模型檢測方法與溫度模型檢測方法進行實驗,檢測結(jié)果表明,基于溫度的檢測方法在溫度變化的情況下具有更好的穩(wěn)定性,檢測準(zhǔn)確性也優(yōu)于原檢測方法,同時改進后的檢測方法避免每次測量前人工標(biāo)定所需的拆卸步驟,更加有利于在線使用。
2 濃度檢測動力學(xué)模型建立
酶注射式生物傳感器[5]反應(yīng)池中發(fā)生酶促反應(yīng),由米氏方程可知,葡萄糖發(fā)生酶促反應(yīng)時,首先生成中間絡(luò)合物,中間產(chǎn)物分解產(chǎn)生H2O2,H2O2在鉑電極處分解產(chǎn)生電子,其反應(yīng)機理:
E+Sk1k
該機理模型中,指數(shù)部分存在的原因是由于在反應(yīng)初始中間絡(luò)合物的逐漸形成而引起的; 但根據(jù)米氏方程,底物與酶發(fā)生反應(yīng)生成中間絡(luò)合物的可逆反應(yīng)會瞬間達到平衡,短時間內(nèi)絡(luò)合物濃度保持不變,使得H2O2的濃度增加速率是不變的,所以可省略指數(shù)部分。H2O2生成速率以線性形式增長,而電子由H2O2分解得到,即電流可表示為I=neD PEFP,其中, ne為反應(yīng)過程中交換電子數(shù), D PE為H2O2擴散系數(shù), F為法拉第常數(shù)[7]。故可知其電流變化初始斜率為:
本研究組前期工作中建立的酶注射式葡萄糖生物傳感器檢測方法基于公式(3)所得,稱為動力學(xué)模型檢測方法:首先利用酶注射式葡萄糖生物傳感器得到已知葡萄糖濃度為[S1]、[S2]的兩種標(biāo)準(zhǔn)液的反應(yīng)電流初始斜率K1、K2,并利用公式(3)確定濃度檢測動力學(xué)模型中的參數(shù)C和Km; 測量待測液,得到反應(yīng)過程中電流的初始斜率K; 最后將已標(biāo)定的參數(shù)C、Km以及初始斜率K代入公式(3),得到待測液的葡萄糖濃度[S]。簡單概括為:首先利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定葡萄糖生物傳感器濃度檢測動力學(xué)模型中的參數(shù)C和Km,之后利用已知模型進行待測液的檢測。
在實際使用中,標(biāo)準(zhǔn)液處于室溫狀態(tài),與發(fā)酵液溫度之間存在溫差。而參數(shù)C和Km中存在反應(yīng)速率k1,k
1,k2,所以C和Km會受溫度的影響。這樣就導(dǎo)致了在存在溫差的情況下,室溫狀態(tài)下標(biāo)定的參數(shù)C和Km并不能用于待測液的檢測。本研究利用溫度改進檢測方法,消除了溫度對測量結(jié)果的影響。
3 基于溫度的濃度檢測模型研究
3.1 基于溫度的濃度檢測模型
式中a、b、lna′, lnb′均為定值,未知量為溫度T以及反應(yīng)初始電流斜率K?;诖四P停玫礁倪M后檢測方法,稱為溫度模型檢測方法:生物傳感器對待測液葡萄糖濃度進行檢測,得到反應(yīng)的初始電流斜率K′; 與此同時,通過反應(yīng)池中的溫度傳感器得到混合液的溫度T′; 之后利用公式(6)將得到的初始斜率K′與T′同時代入,以得到被測葡萄糖濃度[S′]。
3.2 基于溫度的濃度檢測模型參數(shù)測定
3.2.1 實驗設(shè)計 為確定公式(6)中的參數(shù)a、b、lna′、lnb′,設(shè)計如下實驗:
實驗原理:利用公式(4)、(5)可以分別得到C和Km與溫度T的另一種關(guān)系表達式: lnC=b′T+lna′、lnKm=bT+lna。由此可知, lnC與lnKm分別與1T成比例關(guān)系。首先在不同溫度下利用酶注射式葡萄糖生物傳感器得到不同葡萄糖糖濃度的反應(yīng)初始斜率; 再利用公式(3)得到不同溫度下的動力學(xué)模型參數(shù)C和Km; 分別對lnC\,lnKm與1T進行數(shù)據(jù)擬合,最終得到a、b、lna′\,lnb′的值。
3.2.2 儀器與試劑 酶注射式葡萄糖生物傳感器(自制); 金屬浴加熱器(一恒 TU.100C); 不同濃度葡萄糖溶液(分析滴定用標(biāo)準(zhǔn)溶液); 葡萄糖氧化酶(Solarbio); 緩沖液(山東省科學(xué)院生物研究所)。
3.2.3 實驗方法 根據(jù)北京某發(fā)酵廠數(shù)據(jù)可知,一般發(fā)酵液溫度約為30℃,其中個別發(fā)酵過程因工藝要求會出現(xiàn)溫度略高于40℃的情況。為了盡可能包含實際生產(chǎn)中多種發(fā)酵工藝的不同溫度要求,本實驗分別在25.0, 30.0, 35.0和40.0℃下利用酶注射式生物傳感器得到葡萄糖濃度為1.5, 2.5和3.0 mg/mL的反應(yīng)初始斜率: 首先利用金屬浴加熱器加熱葡萄糖溶液、葡萄糖氧化酶溶液以及緩沖液到設(shè)定的溫度,以此模擬實際反應(yīng)過程中反應(yīng)池中的溫度,利用酶注射式葡萄糖生物傳感器進行反應(yīng)過程中初始斜率的測量。
3.2.4 模型參數(shù)的測定 表1為在不同的溫度條件下由酶注射式葡萄糖生物傳感器測得的不同濃度的葡萄糖溶液的反應(yīng)斜率。從表1可知,在溫度與葡萄糖溶液濃度不變的情況下,生物傳感器得到的斜率不同,這是由于酶促反應(yīng)產(chǎn)生的電流為nA級別,易受干擾,三電極電路及放大濾波電路設(shè)計不合理造成傳感器穩(wěn)定性差,此處通過多次測量的方式使其相對偏差在3%內(nèi),以保證檢測結(jié)果的可靠性。
根據(jù)公式(3)推導(dǎo)可得到1[S]=CKm×1K×1Km,利用此方程進行數(shù)據(jù)擬合得到不同溫度下動力學(xué)參數(shù)力學(xué)參數(shù)C(nA/S)與Km (mg/mL)的值,見表2。
4 實驗驗證
4.1 系統(tǒng)檢測流程圖
別泵入到定量環(huán)中進行定量,之后利用緩沖液將其壓入反應(yīng)池中進行反應(yīng),三電極檢測電路檢測其反應(yīng)初始電流斜率,同時溫度傳感器檢測反應(yīng)池中混合液的溫度,最后將得到的兩參數(shù)傳遞給上位機進行濃度的計算與顯示。
4.2 實驗結(jié)果與分析
利用酶注射式葡萄糖生物傳感器測量濃度為1.5和2.5 mg/mL葡萄糖溶液,得到斜率,并分別用溫度模型檢測方法和動力學(xué)模型檢測方法進行數(shù)據(jù)分析(表3),得到檢測結(jié)果的回收率,回收率表示測量值與真值的接近程度,其計算公式為:P=1-|yi-y|y×100%, 式中,P為回收率, yi為測量得到的葡萄糖濃度值, y為實際葡萄糖濃度值。
用動力學(xué)模型檢測方法進行數(shù)據(jù)分析,系統(tǒng)在室溫下進行標(biāo)定,隨著反應(yīng)時混合液的溫度與標(biāo)定時的溫差增大,測量結(jié)果的回收率逐漸降低; 而用溫度模型檢測方法進行數(shù)據(jù)分析,其回收率檢測結(jié)果會維持在一定范圍內(nèi),不會隨著溫度的改變而變化,這是由于每次檢測都會根據(jù)溫度重新計算濃度檢測動
力學(xué)模型中的C和Km,降低了溫度對檢測結(jié)果的影響。說明溫度模型檢測方法減小了由溫度變化而引起的誤差,提高了實際測量中測量結(jié)果的回收率,同時減少溫度影響,也增強了其穩(wěn)定性。
驗證結(jié)果表明,當(dāng)溫度改變時,溫度模型檢測方法能較好地維持其檢測結(jié)果的回收率,而動力學(xué)模型檢測方法由于標(biāo)定液與待測液溫度不同使得檢測的精確度受到嚴(yán)重影響,說明溫度模型檢測方法能更好地消除溫度引進的誤差,使得測量結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠。
5 結(jié) 論
針對應(yīng)用于發(fā)酵工業(yè)中的酶注射式葡萄糖生物傳感器在實際使用時,標(biāo)定液與待測液溫度不同而導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確的問題,以及為簡化反復(fù)標(biāo)定的繁瑣步驟,進行實驗研究。通過利用Arrhenius equation建立了溫度與原濃度檢測動力學(xué)模型參數(shù)的關(guān)系,并利用此關(guān)系改進了目前已有的檢測方法,避免了在發(fā)酵領(lǐng)域使用時溫度引起的誤差,同時省略標(biāo)定部分,更加有利于實現(xiàn)發(fā)酵工業(yè)中的自動化控制。通過實驗驗證可得到,基于溫度模型的檢測方法能減小溫度對檢測結(jié)果引起的誤差,同時也增強了此傳感器的穩(wěn)定性,能更好地提升傳感器的性能。將改進后的傳感器直接與發(fā)酵工業(yè)中的發(fā)酵罐相連,獨特的酶注射式結(jié)構(gòu)使得可以忽略高溫滅菌引起的酶失活問題,同時,利用新的檢測方法,更有利于在線檢測、控制補料一體化的發(fā)酵操作系統(tǒng)的實現(xiàn)。
References
1 SHI Zhong.Ping, PAN Feng. Fermentation Process Analysis, Control and Detection Technology. Beijing: Chemical Industry Press, 2005: 101-105
史仲平, 潘 豐. 發(fā)酵過程解析、控制與檢測技術(shù). 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2005: 101-105
2 Alonso J M, Bielen A A M, Olthuis W, Kengen S W M, Han Z, Franssen M C R. Appl. Surf. Sci., 2016, 383: 283-293
3 Kamanin S S, Arlyapov V A, Machulin A V, Alferov V A, Reshetilov A N. Rus. J. Appl. Chem., 2015, 88(3): 463-472
4 ZHANG Yan, NAN Cai.Feng, FENG Li, ZHANG Li.Qin, DONG Chuan, SHUANG Shao.Min. Chinese J. Anal. Chem., 2009, 37(7): 1049-1052
張 彥, 南彩鳳, 馮 麗, 張利琴, 董 川, 雙少敏. 分析化學(xué), 2009, 37(7): 1049-1052
5 LIU Guang.Sheng, Gao Xue.Jin, JIA Zhi.Yang, CHENG Li, GENG Ling.Xiao, XUE Ji.Xing. Transducer and Microsystem Technologies, 2012, 31(7): 95-97
劉廣生, 高學(xué)金, 賈之陽, 程 麗, 耿凌霄, 薛吉星. 傳感器與微系統(tǒng), 2012,31(7): 95-97
6 GAO Xue.Jin, LIU Guang.Sheng, CHENG Li, GENG Ling.Xiao, XUE Ji.Xing. Chinese J. Anal. Chem., 2012, 40(12): 1945-1949
高學(xué)金, 劉廣生, 程 麗, 耿凌霄, 薛吉星. 分析化學(xué), 2012, 40(12): 1945-1949
7 GAO Xue.Jin, ZHANG Peng, LI Jiao, WANG Pu. Chinese J. Anal. Chem., 2015, 43(4): 523-527
高學(xué)金, 張 鵬, 李 嬌, 王 普. 分析化學(xué), 2015, 43(4): 523-527
8 Chen L, Wu Z Q, Wang C, Ouyang J, Xia X H. Anal. Methods, 2012, 4(9): 2831-2837
9 Snyder S L, Mcauley K B, Mclellan P J, Brouwer E B, Mccaw T. Sens. Actuators B, 2011, 156(2): 621-630
工作開展情況
(一)領(lǐng)導(dǎo)高度重視,組織保障落實有力
一是完善組織機構(gòu)。
為抓好“七五”普法工作,XX鎮(zhèn)成立了“七五”普法工作領(lǐng)導(dǎo)小組,由鎮(zhèn)黨委書記擔(dān)任組長,鎮(zhèn)黨委副書記、鎮(zhèn)長任副組長,其他班子成員為小組成員,負(fù)責(zé)“七五”普法工作的研究和決策。領(lǐng)導(dǎo)小組下設(shè)辦公室,配有專門聯(lián)絡(luò)員具體負(fù)責(zé)普法日常工作。
二是制定工作方案。
結(jié)合上級文件精神及鎮(zhèn)情實際,領(lǐng)導(dǎo)小組研究制定了《XX鎮(zhèn)“七五”普法規(guī)劃》,明確了主要目標(biāo)、主要任務(wù)、對象和要求等,為深入開展“七五”普法提供了路線圖。
三是建立考核機制。
堅持和完善普法、依法治理工作考核評估機制,將普法、依法治理工作納入鎮(zhèn)黨委、政法重要議事日程,推行“誰執(zhí)法誰普法”、依法治鎮(zhèn)工作與綜治維穩(wěn)、平安建設(shè)工作統(tǒng)一部署,統(tǒng)一檢查考評,有力促進我鎮(zhèn)普法、依法治理工作規(guī)范、有序開展。
(二)依托重點工程,法治文化建設(shè)有力
一是大力實施農(nóng)村“法律明白人”培養(yǎng)工程。
制定了《關(guān)于在全鎮(zhèn)農(nóng)村實施“法律明白人”培養(yǎng)工程工作方案》,利用3-5年的時間,分步驟、分階段實施農(nóng)村“法律明白人”培養(yǎng)工程,推動農(nóng)村形成辦事依法、遇事找法、解決問題用法、化解矛盾靠法的濃厚氛圍。截止目前,通過集中培訓(xùn)、送法下鎮(zhèn)、法律明白人網(wǎng)校培訓(xùn)等方式,我鎮(zhèn)已培養(yǎng)農(nóng)村“法律明白人”2000余人,培養(yǎng)骨干“法律明白人”248人。
二是加強村級法治宣傳陣地建設(shè)。
積極營造濃厚的法治氛圍,通過微信、宣傳欄、橫幅等載體做好法治宣傳工作。同時在各村書寫法治宣傳標(biāo)語、建設(shè)法治宣傳長廊、法治宣傳欄,定期更新維護宣傳內(nèi)容,為廣大人民群眾搭建了學(xué)法、
用法的平臺。
(三)緊扣重點對象,普法宣傳深入有力
我鎮(zhèn)積極緊扣法治宣傳教育重點對象,發(fā)揮示范效應(yīng),帶動和促進全民法治宣傳教育。
一是抓住領(lǐng)導(dǎo)干部這個“關(guān)鍵少數(shù)”,積極發(fā)揮領(lǐng)導(dǎo)干部帶頭學(xué)法、模范守法引領(lǐng)作用。
健全完善黨委中心組會議和鎮(zhèn)黨政聯(lián)席會議學(xué)法制度,實現(xiàn)黨政干部學(xué)法經(jīng)?;?、制度化。重點在機關(guān)、站所干部中開展學(xué)法用法活動,將鎮(zhèn)干部作為法治宣傳教育工作的重點對象,堅持領(lǐng)導(dǎo)干部法治講座制度、行政執(zhí)法人員法律知識培訓(xùn)制度,不斷創(chuàng)新學(xué)法形式,增強學(xué)法用法的效果。健全完善重大決策合法性審查機制,積極推進政府法律顧問制度,聘請了謝鳳香同志為鎮(zhèn)政府及各村常年法律顧問,為鎮(zhèn)黨委、政府、村委提供法律咨詢。
二是從青少年抓起,引導(dǎo)青少年從小養(yǎng)成學(xué)法、守法好習(xí)慣。
組織開展“法治進校園”活動,充分發(fā)揮學(xué)校法治教育的主渠道作用,完善青少年法治宣傳教育相關(guān)制度,加強法治課教師、法治副校長、法治輔導(dǎo)員的配備管理,充分利用開學(xué)第一課、主題班會、國旗下講話開展青少年法治教育。開展校園欺凌現(xiàn)象專項治理,加大對校園暴力犯罪的懲處力度,堅決維護學(xué)校穩(wěn)定,有效保障學(xué)生安全。
存在的問題
我鎮(zhèn)“七五”普法工作雖然取得了一定成效,但也還存在一些問題:一是個別單位對普法工作重視不夠,對法治建設(shè)的思想認(rèn)識不到位,開展普法工作的主動性不足。二是普法宣傳創(chuàng)新性不足,宣傳形式以傳統(tǒng)手段為主,需要進一步拓展思路,研究一些讓群眾更易接受、更喜聞樂見的宣傳手段。三是普法宣傳力度還不夠,宣傳隊伍力量薄弱。
三、下步工作打算
(一)深入推進“法律明白人”培養(yǎng)工程,邀請專業(yè)法律人才進行專業(yè)授課,提高集中培訓(xùn)效果;
二、深入學(xué)習(xí)宣傳貫徹黨的四中全會精神。按照黨的四中全會《決定》中關(guān)于加大全民普法工作力度的要求,走進基層、深入群眾,結(jié)合普法工作,大力宣傳我國的根本制度、基本制度、重要制度,促進廣大干部群眾把思想和行動統(tǒng)一到全會精神上來。
三、深入開展憲法法律和黨內(nèi)法規(guī)宣傳教育活動。各部門各單位常態(tài)化學(xué)習(xí)宣傳憲法,普法辦精心組織2020年度“12.4”國家憲法日和憲法宣傳周宣傳活動。各單位根據(jù)工作職責(zé)開展送法進企業(yè)、進農(nóng)村、進機關(guān)、進社區(qū)、進網(wǎng)絡(luò)、進景區(qū)景點活動。
四、深入開展肺炎疫情防控法治宣傳教育工作。進一步貫徹落實關(guān)于堅決打贏肺炎阻擊戰(zhàn)的一系列決策部署,針對疫情防控工作中熱點問題,采取多種形式組織開展傳染病防治法等法律法規(guī)宣傳和以案釋法活動,為疫情防控提供法治保障,營造良好輿論氛圍。
一、組織領(lǐng)導(dǎo)和保障能力得到加強。
為切實加強“七五”期間的法治宣傳教育工作,加強對普法依法治理工作的組織領(lǐng)導(dǎo),我館將普法工作作為一項長期性工作來抓,制定了《縣檔案局檔案七五普法規(guī)劃》,建立了以館長為組長,分管領(lǐng)導(dǎo)為副組長,相關(guān)股室為成員的普法領(lǐng)導(dǎo)小組,指定專人具體負(fù)責(zé)日常工作,并根據(jù)人員崗位變動,及時調(diào)整了小組成員,負(fù)責(zé)普法工作信息的及時溝通,保障了全館上下普法工作的順利、有序、有效銜接,為普法工作奠定了堅實的組織基礎(chǔ)。普法領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)對“七五”普法工作進行統(tǒng)一安排部署,決定七五普法工作中的重大事項,并將普法依法治理工作納入重要議事日程,納入了黨支部和職工政治學(xué)習(xí)計劃、納入了年度工作目標(biāo)考核??朔藛T、經(jīng)費困難,盡最大努力保證了普法工作機構(gòu)、人員、工作經(jīng)費三落實,確保了檔案系統(tǒng)“七五”普法工作的順利開展。制定了《縣檔案局“七五”法治宣傳教育規(guī)劃(2016—2020年)》和年度工作實施意見,按時對工作開展情況進行自查總結(jié),制定了檔案法制宣傳相關(guān)制度,宣傳方案,印發(fā)了《檔案法》、《檔案法實施辦法》等法制宣傳資料,組建了一支由業(yè)務(wù)骨干和執(zhí)法人員構(gòu)成的檔案法宣講隊伍,對全縣的檔案普法工作進行宣傳指導(dǎo)監(jiān)督,對好的做法和經(jīng)驗進行了推廣和宣傳,并按時做好普法檔案資料的收集、歸檔。
二、“七五”普法制度健全、管理規(guī)范。
積極推行法制宣傳教育工作領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任制,建立了領(lǐng)導(dǎo)班子學(xué)法制度、干部職工學(xué)法制度、重大事項集體討論決策制度、重大事項決策前法律咨詢制度、行政執(zhí)法責(zé)任制考核評議制度、行政執(zhí)法過錯責(zé)任追究制度、行政執(zhí)法公示制度、執(zhí)法人員管理規(guī)定等制度。從制度上約束和規(guī)范干部職工行政行為。要求全體干部職工嚴(yán)格依法辦事,不允許出現(xiàn)違反規(guī)定的做法。在工作中必須符合法律政策的要求,結(jié)合單位工作的實際情況,為各項法律法規(guī)的落實提供保證。
三、突出重點,多渠道開展普法教育
1、領(lǐng)導(dǎo)帶頭、認(rèn)真組織干部職工學(xué)法。為調(diào)動大家參與學(xué)習(xí)的積極性,我館堅持并完善各種學(xué)習(xí)制度,堅持集中學(xué)習(xí)和自學(xué)相結(jié)合,盡力化解工學(xué)矛盾,努力提高領(lǐng)導(dǎo)干部、工作人員和執(zhí)法人員的法制意識,增強依法行政能力。組織征訂了“七五”普法讀本、《行政強制法》宣傳掛圖、《社會保險法》等法律法規(guī)、廉政建設(shè)學(xué)習(xí)資料及檔案法律規(guī)范等資料,設(shè)置“法律圖書角”,不斷增加“七五”普法所學(xué)的法律、法規(guī)內(nèi)容,方便干部職工開展自學(xué)。充分利用每周二五的政治及業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)時間進行相應(yīng)輔導(dǎo)學(xué)法,認(rèn)真學(xué)習(xí)十、報告、新時代社會主義思想理論,《憲法》、黨的方針政策及《檔案法》《機關(guān)檔案工作條例》《省〈中華人民共和國檔案法〉實施辦法》《省國家檔案館管理辦法》《會計檔案管理辦法》《城市社區(qū)檔案管理辦法》《村級檔案管理辦法》《省檔案“七五”普法讀本》等檔案法律法規(guī)和規(guī)章,完成了規(guī)定的學(xué)習(xí)時間。通過學(xué)習(xí),從而達到提升人員素質(zhì)、不斷改進服務(wù)技能的良性循環(huán),實現(xiàn)機關(guān)內(nèi)部日常管理科學(xué)化,法治化。
2、加強全縣檔案工作人員教育培訓(xùn)。按照“誰執(zhí)法、誰普法”要求,結(jié)合檔案業(yè)務(wù)指導(dǎo)檢查工作,強化全縣檔案工作人員法制知識的宣傳培訓(xùn),組織縣機關(guān)、企業(yè)參加省檔案局業(yè)務(wù)培訓(xùn),每年舉辦1-2期縣級機關(guān)檔案業(yè)務(wù)培訓(xùn),對機關(guān)檔案人員進行了“零距離”指導(dǎo),“面對面”解決實際問題,提升了基層檔案人員檔案法制意識和業(yè)務(wù)水平。
3、主題教育取得成效。按照縣普法宣傳教育總體部署,緊密結(jié)合檔案工作實際,積極開展普法主題教育活動和“12.4”法制宣傳活動。結(jié)合“扶貧幫扶”、檔案執(zhí)法檢查、檔案培訓(xùn)、“6.9”國際檔案日等活動,組織人員深入基層進行黨規(guī)法紀(jì)宣講,參與縣上大型普法活動,在醒目的位置懸掛宣傳標(biāo)語,向全縣群眾散發(fā)《中華人民共和國檔案法》、省《中華人民共和國檔案法實施辦法》、《省行政村檔案工作暫行辦法》、《省重大建設(shè)項目檔案管理辦法》等普法資料共計5000余份。組織全縣機關(guān)單位工作人員參加了黨建、普法、檔案法律法規(guī)知識有獎競賽等活動,在全縣廣泛普及了檔案法制觀念,進一步提高了社會檔案意識和檔案法制觀念,產(chǎn)生了良好的社會效果。
4、充分利用新媒體開展法制宣傳教育。除了傳統(tǒng)的設(shè)立宣傳墻報、宣傳欄、指導(dǎo)、咨詢、發(fā)放宣傳資料等形式的宣傳手段,我館還注重利用網(wǎng)絡(luò)進行法制宣傳,在微信、QQ群中上傳檔案法規(guī)、涉民文件、普法活動、檔案業(yè)務(wù)信息等相關(guān)內(nèi)容學(xué)習(xí)文件,豐富了普法工作的內(nèi)容和形式,增強了大家做好普法工作的積極性。
四、圍繞中心,開展普法宣傳
1、堅持普法與做好本職工作相結(jié)合,促進檔案事業(yè)全面發(fā)展。緊密結(jié)合扶貧幫扶、抗震救災(zāi)、災(zāi)后重建、機構(gòu)改革等重點工作任務(wù),加強檔案業(yè)務(wù)檢查指導(dǎo)、培訓(xùn)、督查工作,大力開展民族政策、檔案法規(guī)的宣傳,進一步加強鄉(xiāng)鎮(zhèn)對村、寺廟檔案工作的指導(dǎo)檢查責(zé)任。每年至少開展開展一次檔案執(zhí)法大檢查,對機關(guān)檔案室規(guī)范化管理和特定業(yè)務(wù)檔案工作開展情況進行指導(dǎo)督查。
2、推進社會主義法治文化建設(shè)。以宣傳法律知識、弘揚法治精神、推動法治實踐為主旨,積極推進社會主義法治文化建設(shè),充分發(fā)揮法治文化的引領(lǐng)、熏陶作用,使人民內(nèi)心擁護和真誠信仰法律。結(jié)合機關(guān)文化建設(shè),鼓勵工作人員結(jié)合實際,撰寫普法文章和檔案信息,向《檔案信息》網(wǎng)站和門戶網(wǎng)站上進行投稿,在政府信息公開中對檔案法規(guī)、涉民文件、普法活動、檔案業(yè)務(wù)信息等信息進行及時公示。全面落實行政權(quán)力規(guī)范運行和監(jiān)督工作,及時清理上報行權(quán)清單,按照要求對行權(quán)運行情況納入平臺運行,接受監(jiān)督。
五、加強整治,提高依法治理水平
1、加強檔案執(zhí)法隊伍建設(shè)。為提高執(zhí)法人員素質(zhì),積極組織單位職工參加省、州檔案局及縣委、縣政府組織的各類政治、法制、業(yè)務(wù)和消防安全培訓(xùn)教育活動和網(wǎng)絡(luò)執(zhí)法人員培訓(xùn),參加普法知識考試,保證了檔案執(zhí)法人員的數(shù)量和質(zhì)量。逐步完善了檔案行政執(zhí)法責(zé)任制,提高了檔案執(zhí)法人員的法制觀念、法律意識和執(zhí)法水平,在檔案執(zhí)法過程中做到堅持亮證執(zhí)法,依法行政,公平執(zhí)法,在執(zhí)法檢查中認(rèn)真進行“兩法”宣傳講解答凝,樹立了檔案執(zhí)法良好形象。
2、做好監(jiān)督檢查,落實監(jiān)督責(zé)任。將普法的理念融入檔案管理的全過程,通過加強宣傳教育和監(jiān)督考核,促進行為養(yǎng)成。加強政風(fēng)行風(fēng)建設(shè),及時發(fā)現(xiàn)和糾正干部職工不規(guī)范行為,“七五”期間,我縣無檔案違法案件發(fā)生。
為加強對七五普法教育工作的領(lǐng)導(dǎo),確保普法活動順利實施,根據(jù)文件要求,成立了以局長為組長,副局長為副組長,各股室負(fù)責(zé)人為成員的2020年七五普法工作領(lǐng)導(dǎo)小組,并下設(shè)辦公室在局綜合辦公室。在健全組織機構(gòu)的同時,我們細(xì)化任務(wù)、明確分工,切實推進普法工作順利開展。普法工作離不開學(xué)習(xí)資料,辦公室在證訂普法資料時,均以保證本部門本單位普法學(xué)習(xí)的需要為前提,干部學(xué)法讀本的證訂數(shù)均按照上級要求如數(shù)征訂。同時,結(jié)合自身執(zhí)法的實際,對業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)用書做到人手一冊。
二、明確任務(wù),制訂規(guī)劃
為適應(yīng)依法治理和普法工作的要求,進一步廣泛深入地學(xué)習(xí)、宣傳法律法規(guī)知識,特別是安全生產(chǎn)、項目招投標(biāo)、工程建設(shè)安全等相關(guān)的法律法規(guī)知識,加強我縣法制建設(shè),全面推進各項事業(yè)的依法管理,同時,根據(jù)規(guī)劃,結(jié)合實際,制定了年度普法工作計劃,從而在時間上、制度上、措施上保證了七五普法工作的扎實開展,加強了普法工作的針對性和實效性。
三、精心組織,狠抓落實
自七五普法規(guī)劃制定后,按照《規(guī)劃》提出的總體要求具體部署,普法學(xué)習(xí)采取集中培訓(xùn)與自學(xué)相結(jié)合,面向全局干部職工以及群眾,有計劃、有步驟地開展了法律、法規(guī)、條例等的宣傳教育活動,并取得了一定的實效。定期組織干部職工學(xué)法,并組織開展各類法制培訓(xùn)班,從各個層面保證了普法教育宣傳工作的有效開展。
半年來,干部職工堅持自學(xué)法律,認(rèn)真學(xué)習(xí)相關(guān)法律、法規(guī)和規(guī)章,交流執(zhí)法程序中需要改正的地方和執(zhí)法業(yè)務(wù)知識,不斷提升執(zhí)法業(yè)務(wù)水平;自覺增強依法行政意識,努力提高依法行政的水平和能力;在抓好各類普法工作的同時,我們還十分注重對部門法規(guī)規(guī)章的社會宣傳和普及工作;以每年禁毒法制宣傳日、世界環(huán)保日等一系列活動為載體,通過懸掛標(biāo)語、設(shè)置宣傳欄、接受群眾咨詢、發(fā)送宣傳資料等形式大力宣傳法律法規(guī)知識,發(fā)放宣傳手冊200余份,接待群眾咨詢200余人。
四、強化管理,依法行政
堅持每月組織干部兩次學(xué)習(xí)日,其中,一次用于法制培訓(xùn)會,內(nèi)容以常用法律法規(guī)為主,由各股室業(yè)務(wù)骨干任輔導(dǎo)員,把行政管理轉(zhuǎn)變?yōu)橐婪ü芾?,努力提高依法辦事、依法行政水平;堅持每季度召開一次大會培訓(xùn);對全體干部職工進行法律法規(guī)知識培訓(xùn),依托群眾工作開展堅持到聯(lián)系點單位開展法制宣傳活動,深入基層開展‘法制下鄉(xiāng)’活動,提高廣大農(nóng)牧民群眾的法律素質(zhì)和社會化管理水平。
五、存在的問題
貫徹執(zhí)行七五普法規(guī)劃的這半年來,雖然取得了一定成績,但不可否認(rèn)的也存在著一些問題與不足,主要表現(xiàn)在以下幾個方面:一是法制培訓(xùn)的區(qū)域覆蓋范圍還有待加強;二是宣傳方式有些單一、片面、內(nèi)容覆蓋面不廣。
2、建立健全普法責(zé)任制,強化普法工作組織領(lǐng)導(dǎo)。按要求建立了我局普法工作責(zé)任制,明晰了我局統(tǒng)計普法責(zé)任主體,明確了統(tǒng)計法律法規(guī)宣傳普及為主體,大力宣傳憲法、基本法律法規(guī)、執(zhí)法司法適用的法律法規(guī)并行兼重的統(tǒng)計普法重點任務(wù),落實了權(quán)責(zé)統(tǒng)一、及時有效、普法并舉、條塊結(jié)合的普法工作原則。成立了以局長為組長,以分管人員和普查中心主任為副組長,其科室專業(yè)人員為其成員的統(tǒng)計普法工作領(lǐng)導(dǎo)小組。建立了以分管領(lǐng)導(dǎo)督辦、普查辦具體抓落實、相關(guān)專業(yè)科室分工合作的組織運作機制,并對關(guān)鍵點和重大時點的普法工作實施時間、人力、物力上的重點傾斜,為普法宣傳工作提供了強力支撐。
3、架構(gòu)聯(lián)合普法宣傳新模式。緊緊圍繞普查(經(jīng)濟普查、農(nóng)業(yè)普查、人口普查全國重大普查標(biāo)準(zhǔn)時點日和以“12.4”國家憲法日、“12.8”日統(tǒng)計法頒布紀(jì)念日)三個關(guān)鍵點集中宣傳為主軸。懸掛橫幅100多幅次,印放《致調(diào)查對象的一封信》、《統(tǒng)計法》、《農(nóng)業(yè)調(diào)查要點》、《人口抽樣變動調(diào)查制度》等知識宣傳手冊5000余份,營造濃厚的普法輿論氛圍,提升重點對象的學(xué)法守法自覺性主動性。
為提高學(xué)校依法決策、依法管理水平,維護校園穩(wěn)定,維護師生合法權(quán)益,保證教育方針的全面貫徹實施,學(xué)校特成立了以xx校長為組長的依法治校領(lǐng)導(dǎo)小組,制定了學(xué)?!捌呶濉逼辗ㄒ?guī)劃和年度工作計劃,聘請了蒲亭鎮(zhèn)派出所xx同志和法院xx同志為法制副校長,加強學(xué)生的法制教育,增強了師生的法制觀念。
二、規(guī)范辦學(xué)行為,依法管理學(xué)校
1、建立完善的領(lǐng)導(dǎo)體制,充分發(fā)揮集體的作用。凡學(xué)校有重大事項都經(jīng)學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)班子集體研究,再召集全體教師進行討論,經(jīng)全體教師通過后方才執(zhí)行,堅持做到校務(wù)、政務(wù)公開。
2、健全學(xué)校安全管理制度。著重做好校園基礎(chǔ)設(shè)施的安全檢查工作,對存在安全隱患的地方進行徹底整改,切實消除安全隱患,確保師生的人身安全;加強校園的治安管理,學(xué)校實行領(lǐng)導(dǎo)帶班、教師值班巡邏制度,確保學(xué)校良好的治安環(huán)境;加強學(xué)校消防和用電管理,定期檢查消防設(shè)施和器材,及時更換老化電線,確保學(xué)校用電、用水安全;制定了安全方面的各項應(yīng)急預(yù)案,確保在緊急狀況下,師生能夠迅速疏散,同時利用國旗下講話、班會時間加強對學(xué)生進行安全教育,增強學(xué)生的自防自救能力。
3、認(rèn)真執(zhí)行國家課程計劃,嚴(yán)格按照課程計劃開設(shè)課程,做到開足、開齊課,特別是學(xué)校里的思想品德課,要求每位老師認(rèn)真上好每節(jié)課。學(xué)校嚴(yán)格遵守上級主管部門規(guī)定的作息時間,不隨意變動上課時間,不在假期里給學(xué)生補課。
4、加強學(xué)生思想道德教育、法制教育。以《小學(xué)生守則》、《小學(xué)生日常行為規(guī)范》為主線,開展形式多樣、豐富多彩的活動,利用國旗下講話,主題班會活動對學(xué)生進行思想、法制教育。在法制教育上做到了“四落實”,即有教師、有教材、有課時、有活動。
5、規(guī)范收費行為,切實治理亂收費現(xiàn)象。凡涉及向?qū)W生、家長代收費的,我校都嚴(yán)格按照財政、物價及上級教育行政主管部門核定的收費范圍、收費標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行,在執(zhí)行過程中本著自愿原則,并在收費期間向?qū)W生、家長進行公示,維護了學(xué)校、教師在人民群眾中的形象。
三、開展“法律進校園”活動,堅持品德教育與法制教育并進
1、采取課堂教育和集中宣傳教育相結(jié)合的方式,推動學(xué)生學(xué)法的落實。一是制定好法制教育工作計劃,明確課時安排,通過日常課堂教學(xué)加強對學(xué)生法制教育,推進學(xué)校法制教育計劃、教材、課時、師資的“四落實”;二是要利用全國法制宣傳日、全國安全教育日等特定時間,開展集中法制宣傳教育活動,不斷提升學(xué)校學(xué)生學(xué)法的效果。
2、采取“小手牽大手活動”,推動學(xué)生和家長互動式的法律學(xué)習(xí)。每月要求各班開展一次法制宣傳教育班會活動,要求每個同學(xué)在班會上講一個法制故事。課后每個同學(xué)回去給家長講一個發(fā)生在你身邊或所知道的遵紀(jì)守法小故事或違法必受罰的案例,讓學(xué)生和家長一起來學(xué)法、用法,提高全民的法律素養(yǎng)。
3、采取靈活多樣的教育方式,促進學(xué)生的學(xué)法用法。把法制教育與思想品德教育密切結(jié)合起來,把反面典型教育與正面教育、全面教育與個別教育有機結(jié)合,把法制教育與日常行為規(guī)范達標(biāo)、依法治校結(jié)合起來。不斷探索法制教育方式方法,增強法制教育的實效性和吸引力。近年來,學(xué)校通過開展法制講座、法制知識競賽、法制手抄報等生動活潑的形式,指導(dǎo)學(xué)生積極參加各種法制活動,在實踐中增長法律知識。
4、以創(chuàng)建“平安校園示范學(xué)?!睘槠鯔C,抓好學(xué)生普法教育。以創(chuàng)建工作為載體,加強對學(xué)生的安全防范教育,依法開展校園及周邊治安環(huán)境的專項治理工作,從而實現(xiàn)教育隊伍更加穩(wěn)定、校園秩序更加優(yōu)化、法治環(huán)境更加規(guī)范、安全管理更加完善的目標(biāo)。①進一步明確學(xué)校安全目標(biāo),深入開展安全法制教育,舉辦專題講座,提高全校師生的安全、防范意識;②加大綜合治理工作力度,落實校園安全責(zé)任制;③建立聯(lián)控聯(lián)防長效機制,深入整治校園周邊環(huán)境,嚴(yán)禁學(xué)生在課間出入校園,努力營造良好的外部環(huán)境④加大檢查力度,堅持季度檢查與平時檢查相結(jié)合,重點對校園教學(xué)樓門窗、電路、體育設(shè)施等隱患進行檢查,做到防患于未然。⑤加強與相關(guān)部門聯(lián)合行動,加強對學(xué)生依法維護合法權(quán)益的指導(dǎo)。使青少年懂得用法律武器維護自身的合法權(quán)益,同不良行為作斗爭,增強青少年自我保護意識和能力。
5、多渠道宣傳,拓寬法律宣傳學(xué)習(xí)的寬度和廣度。在強化學(xué)法的前提下,加強了法律知識的宣傳。學(xué)校的宣傳櫥窗,每學(xué)期都有法律知識的宣傳和違法行為圖片展。各班黑板報定期有法律知識的內(nèi)容,并把此項內(nèi)容作為班級考核、文明班級的評比的主要條件。
通過扎實開展上述“七五”普法宣傳教育活動,我?!捌呶濉逼辗üぷ魅〉妹黠@成效:一是師生法律知識普及率達到100%,二是師生安全無事故、無輟學(xué)、無違法犯罪、無盜竊案件、無刑事案件等;三是師生的遵紀(jì)守法率達到100%,教育教學(xué)質(zhì)量穩(wěn)步提高。