時(shí)間:2023-03-02 15:09:57
導(dǎo)言:作為寫作愛好者,不可錯(cuò)過為您精心挑選的10篇冰箱使用注意事項(xiàng),它們將為您的寫作提供全新的視角,我們衷心期待您的閱讀,并希望這些內(nèi)容能為您提供靈感和參考。
1、冰箱應(yīng)放置在遠(yuǎn)離熱源的地方,例如火爐和散熱器,同時(shí)避免陽光直射。這有利于冰箱的散熱,冰箱應(yīng)放置在濕度低的地方。存放在通風(fēng)良好的地方。冰箱的背面應(yīng)與墻壁保持10厘米以上的距離,頂部應(yīng)有30厘米以上的高度空間,不要在周圍放置太多雜物。
2、冰箱應(yīng)放在穩(wěn)固的地面上。否則,壓縮機(jī)啟動(dòng)時(shí)會振動(dòng)并發(fā)出大量噪音,時(shí)間久了會縮短電冰箱使用壽命。也不要將重物或雜物放在冰箱上,尤其是其他電器上。冰箱工作時(shí),應(yīng)盡量減少開門次數(shù),以減少冷氣的外流。趣丁網(wǎng)
3、電源電壓波動(dòng)很大。如果反復(fù)切斷電源,則暫時(shí)不用冰箱,并拔下電源插頭,以防止壓縮機(jī)燒壞。冰箱停下后,不要立即打開電源啟動(dòng)壓縮機(jī),停下2-5mm后再啟動(dòng)壓縮機(jī)。在暫時(shí)斷電的情況下,應(yīng)先將冰箱的電源拔下;在停電期間,請嘗試減少開門次數(shù)。當(dāng)冰箱門緊緊關(guān)閉時(shí),食物可以保持新鮮15-20小時(shí)。
以上是關(guān)于使用冰箱注意事項(xiàng)有哪些的介紹,而冰箱是每天都使用的,所以冰箱的使用安全非常重要。
(來源:文章屋網(wǎng) )
【關(guān)鍵詞】老年糖尿病 糖尿病用藥 口服降糖藥
1 選擇口服降糖藥的要求病人對藥物的選擇有個(gè)基本的了解。選擇口服降糖藥的品種有以下幾個(gè)原則:
1.1 應(yīng)定時(shí)、定量遵醫(yī)囑服用,且須作服藥記錄。記錄內(nèi)容包括藥名、劑量及增減情況、服法、服藥后反應(yīng)、血糖及尿糖檢查結(jié)果、飲食情況。
1.2 各種制劑,均宜從較小劑量開始,每晨服1次,然后按病情及療效逐漸酌增劑量較為穩(wěn)妥。
1.3 如有胃腸不適、皮膚過敏、白細(xì)胞減少、肝功能受損或低血糖反應(yīng)時(shí),應(yīng)及時(shí)找醫(yī)生處理。
1.4 長期服用某一制劑時(shí),可漸見無效,則須及時(shí)換用另一制劑。
1.5 注意藥物配伍,以合理使用劑量或慎用、禁用某些藥物。如磺脲類與雙脲類同時(shí)使用可增強(qiáng)降血糖作用。磺脲類與下列藥物同時(shí)使用時(shí),降血糖作用增強(qiáng):水楊酸及其鹽類、氨基比林、保泰松、磺胺藥、胍乙淀、利血平、可樂寧、心得安、四環(huán)素、氯霉素、消炎痛等;與下列藥物同時(shí)使用,其降血糖作用將減弱:異搏定、硝苯吡啶、利尿劑、皮質(zhì)激素、甲狀腺激素、雌激素、利福平、巴比妥、氯丙嗪、口服避孕藥等。 1.6注意患者肝、腎功能??诜堤撬?糖腎平除外)在肝臟內(nèi)代謝,由腎臟排泄,在伴有肝、腎功能不全的糖尿病病人中不宜使用。
2 老人糖尿病患者用藥后特別要當(dāng)心夜間低血糖
首先,老年人代謝率低,用藥容易發(fā)生低血糖,尤其是服用一些長效磺脲類如優(yōu)降糖時(shí),易發(fā)生晚間低血糖。因此,對這些藥,即使要用,也應(yīng)避免1日3次用藥。小劑量時(shí)可早晨一次服,中劑量時(shí)則早晨服2/3,中午服1/3,晚間不用。
老年人因?yàn)樯窠?jīng)反應(yīng)等比較遲緩,更易發(fā)生“未察覺的低血糖”。即當(dāng)血糖下降到一般人有交感神經(jīng)反應(yīng),如心悸、冷汗、頭暈等癥狀時(shí),老年人可能仍無感覺。一直到血糖降到出現(xiàn)大腦皮層反應(yīng)時(shí),老年患者才直接出現(xiàn)精神神經(jīng)癥狀,如昏迷等。這種情況就很危險(xiǎn),搶救不及時(shí)易危及生命。此外,老年糖尿病病人易并發(fā)動(dòng)脈硬化及心血管病變。一旦發(fā)生低血糖可誘發(fā)腦血管意外和心肌梗死,這都是很危險(xiǎn)的。
3 老年糖尿病患者要注意藥物對肝腎的不良反應(yīng)
有些老年人過去有肝炎、腎炎史,故用藥前應(yīng)先查肝腎功能。在肝功能異常時(shí)不能用雙胍類及胰島素增敏劑,否則易產(chǎn)生肝功能衰竭。許多降糖藥在肝內(nèi)代謝,經(jīng)腎排出。所以在肝腎功能不良時(shí)應(yīng)慎重選藥。在老年糖尿病病人肝腎功能不良或血糖控制不好時(shí),應(yīng)該及早應(yīng)用胰島素治療。但是用胰島素更要防止低血糖,劑量不可過大。尤其是要防止老人視力不好或注射器刻度不清而搞錯(cuò)劑量。近年來不少老年患者應(yīng)用了胰島素筆,它在調(diào)劑量時(shí),除小窗口出現(xiàn)劑量數(shù)字外,同時(shí)還可聽到“噠噠”聲,使劑量不易出錯(cuò)。老年糖尿病病人的防治有其特點(diǎn),病人及其家屬都應(yīng)了解,以取得良好的療效。
總之,口服降糖藥,適用于非胰島素依賴型糖尿病在單純飲食控制后血糖水平仍較高時(shí),不能用于胰島素依賴型糖尿病,以免因無效而貽誤病情。
參考文獻(xiàn)
患者在應(yīng)用胰島素增敏劑過程中有三點(diǎn)注意事項(xiàng):
第一,個(gè)別患者可能會出現(xiàn)不同程度的肝臟損傷,所以要定期檢測肝功能,建議2個(gè)月左右查肝功能,如果檢測結(jié)果正常,說明患者對該藥適應(yīng)性好,可持續(xù)使用。所有格列酮類的藥都規(guī)定要監(jiān)測肝功能;
第二,不管羅格列酮還是匹格列酮,使用后都有輕微的水腫,有的人反應(yīng)比較明顯,但是發(fā)生率不高。單純用藥大概4%~5%的人會發(fā)生,如果聯(lián)合使用胰島素的話,發(fā)生率就更高點(diǎn),因?yàn)橐葝u素本身就有水腫的副作用。這個(gè)不必?fù)?dān)心,可少吃點(diǎn)鹽或者間斷利尿治療,一般不會對身體有影響。但要強(qiáng)調(diào)的是,在老年人伴心功能不好的,吃這類藥會有水腫,增加心臟負(fù)擔(dān),有可能加重心衰,應(yīng)避免使用。
第三,胰島素增敏劑只是增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞提高對胰島素的敏感性,僅在胰島B細(xì)胞功能尚存的情況下發(fā)揮作用,不宜用于胰島素絕對缺乏的1型糖尿病患者。
(上海普陀醫(yī)院每周三、五上午有糖尿病專科門診)
胰島素增敏劑單獨(dú)用藥還是聯(lián)合用藥
早期、病程較短且程度較輕的2型糖尿病,如以胰島素抵抗為主,單純用增敏劑效果不錯(cuò),維持的治療效果也很好。
在養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展的過程中,藥物預(yù)防是雞場疾病防制的主要輔助手段,只有科學(xué)合理的用藥,才能避免因盲目用藥導(dǎo)致養(yǎng)殖成本上升、病原抗藥性增強(qiáng)、肉蛋產(chǎn)品藥物殘留等一系列問題的發(fā)生,從而不斷提高養(yǎng)殖效益。因此,在治療時(shí)應(yīng)遵循以下4個(gè)原則。
1.1 安全原則
安全原則是防控雞病用藥時(shí)必須首先考慮和遵循的基本原則。在選擇藥物時(shí),應(yīng)選用毒副作用小的藥物,同時(shí)還應(yīng)注意配伍禁忌。選用正規(guī)廠家生產(chǎn)的藥物,所選藥品都要有完整的標(biāo)簽或說明書,具體包括有效成分含量、適應(yīng)癥、用法、用量、副作用及處理辦法、休藥期、配伍禁忌、產(chǎn)品批號、產(chǎn)品批準(zhǔn)文號(或進(jìn)口獸藥注冊證號)、生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)廠家、運(yùn)輸貯存保管條件及其他應(yīng)當(dāng)說明的內(nèi)容。
1.2 科學(xué)合理原則
在進(jìn)行預(yù)防性用藥時(shí),要了解疾病易發(fā)時(shí)間,做到適時(shí)用藥。在治療用藥時(shí),首先要盡快確診,查明致病原因,根據(jù)藥敏試驗(yàn)正確用藥、對癥下藥,做到“用藥快、用藥準(zhǔn)、用藥足、療程夠”,并且要避免長期使用同一種藥物防治疾病。此外,根據(jù)藥物的種類、性質(zhì)、使用目的以及動(dòng)物的飼養(yǎng)方法,選擇適宜的用藥方法,合理控制藥物用量和療程,以充分發(fā)揮藥物的性能。
1.3 簡便快捷原則
用藥方法簡單易行,能保證藥物快速地進(jìn)入機(jī)體需要的部位。凡是能口服的藥物,不宜肌肉注射;凡是能肌肉注射的藥物,不宜靜脈注射。即使是口服用藥時(shí),也應(yīng)盡可能地選擇水溶性藥物。一般說來,雞群在發(fā)病后飲水量增加,采食量減少,若采用水溶性藥物,用藥量有所保證,且易被吸收,而采用拌料喂飼,因養(yǎng)殖中目前大多使用顆粒飼料,藥物難以混勻,同時(shí)又因病雞采食量下降,難以保證有足夠藥量進(jìn)入雞體而起到治療作用。因此,在采用拌料給藥時(shí)要考慮病雞的采食量是否有變化。
1.4 經(jīng)濟(jì)實(shí)惠原則
用藥時(shí)要選擇藥效強(qiáng)、見效快、抗菌范圍廣的藥物。在保證治療效果的前提下,應(yīng)盡可能的降低治療成本,選擇價(jià)格合理的藥物,切忌以價(jià)格高低來衡量藥物的優(yōu)劣。
綜上所述,用藥時(shí)遵循的四大原則是相對的,同時(shí)又是相互聯(lián)系的。因此,在雞病防治用藥的過程中,要重視實(shí)踐,并認(rèn)真分析和總結(jié),遇到問題時(shí)才可迎刃而解。
2 選擇適宜的給藥方法
藥物治療是防治雞病的有效措施之一。為了保證藥物的防治效果,用藥時(shí)要根據(jù)用藥目的、疾病類型及藥物本身的性質(zhì)來確定最適宜的給藥方法,從而使藥物發(fā)揮良好的療效,達(dá)到防治疾病的目的。給藥途徑包括飲水、拌料、口服、注射、外用等。預(yù)防用藥時(shí)一般采用飲水或拌料,這樣操作簡便;治療用藥一般采用口服、注射,這樣可保證劑量準(zhǔn)確,療效確實(shí)。飲水給藥時(shí)應(yīng)使藥物充分溶解,并在一定時(shí)間內(nèi)飲完,最好的方法是在用藥前2~3h停止雞群供水。拌料給藥則需將藥物與飼料充分混勻,先把藥物混入少量飼料中拌勻,然后再加入一定量的飼料再次混勻,直至全部混合均勻。口服給藥時(shí),對于不溶于水的粉劑,可加在少許飼料中拌濕后再口服,但應(yīng)注意避免將藥物投入氣管內(nèi)。一般對于腸道難以吸收的藥物采用注射給藥,胸部注射時(shí)要由前向后呈45°斜刺1~2cm,不可刺入過深,腿部注射時(shí)要避開大的血管,不要在注射。外用藥物多用來殺滅體外寄生蟲或局部創(chuàng)傷治療,常用外涂、噴霧、藥浴等方法進(jìn)行。
3 合理安排給藥時(shí)間
3.1 驅(qū)蟲藥
雛雞從7日齡開始用藥,根據(jù)具體飼養(yǎng)條件每周用藥2~3d,注意輪換用藥。肉雞在30日齡左右,蛋雞在60日齡和120日齡左右各用藥1次,選擇上午用藥較為適宜??骨蛳x藥應(yīng)在10~90日齡使用,合理選擇藥物交替用藥,避免產(chǎn)生抗藥性。
3.2 維生素類
作為飼料添加劑的維生素主要是復(fù)合維生素或多種維生素,宜現(xiàn)配現(xiàn)用。針對雞不同生長時(shí)期的營養(yǎng)缺乏病,應(yīng)及時(shí)、適量補(bǔ)充維生素。常用維生素有維生素A、B、D、E及復(fù)合維生素等。
3.3 抗菌素類
抗菌素可通過拌料或飲水服用,應(yīng)按規(guī)定時(shí)間服用,不宜長時(shí)間混在飲水或飼料中,適宜注射的抗菌素口服效果不好。一般雞病治療時(shí)應(yīng)按療程用藥,3d為小療程,5d為中療程,7d為大療程。
3.4 健胃消化藥
如食母生、促菌生等宜在喂料前使用,或者先用少量飼料拌勻喂服。
3.5 微生態(tài)制劑
這類活菌劑宜在抗菌素用過后使用,要現(xiàn)配現(xiàn)用,切忌與抗菌素合用,否則會使其喪失活性。
3.6 消毒藥物
消毒的目的是殺滅病原體,凈化環(huán)境,切斷疾病傳播途徑。大多數(shù)飼養(yǎng)戶比較重視進(jìn)雞前的消毒,而忽視進(jìn)雞后的消毒。其實(shí)進(jìn)雞后消毒更重要,包括飼養(yǎng)人員、雞舍、活動(dòng)場地、用具、飲水的消毒和帶雞消毒等,消毒藥應(yīng)交替使用。
4 用藥注意事項(xiàng)
4.1 同類藥物不宜長期使用
目前市場上各種藥物種類繁多,有的藥物名稱不同而有效成分相同,長期使用會造成同類產(chǎn)品的重復(fù)使用,導(dǎo)致病原菌對該類藥物產(chǎn)生耐藥性而影響療效。為了防止這種情況的出現(xiàn),應(yīng)該將有效的抗菌藥物交替使用,盡可能不在短時(shí)間內(nèi)重復(fù)使用同一種抗菌藥物。當(dāng)然,藥物的交替使用也不能過于頻繁,應(yīng)該在使用1~2個(gè)療程后再考慮換藥。
4.2 選擇適當(dāng)?shù)慕o藥途徑
(1)飲水。飲水給藥時(shí),藥物吸收較快,一般適用于短期投藥,且在病雞只飲水不進(jìn)食或采食量下降時(shí)采用。飲水給藥時(shí),一般在一定范圍內(nèi)藥物的劑量越大,作用愈強(qiáng)。對安全范圍廣的藥物,如青霉素類、喹諾酮類藥物用量可以稍大一些,但是決不能超過安全劑量。安全范圍窄、毒性大的藥物如呋喃類、聚醚類的用量應(yīng)稍小一些,否則容易引起中毒。
(2)拌料。規(guī)模較大的養(yǎng)雞戶及養(yǎng)雞場經(jīng)常使用拌料給藥,適用于大群雞長期投藥,或使用不溶于水的藥物及慢性疾病感染,如大腸桿菌病、沙門氏菌病及其他腸道疾病、球蟲病等。適合拌料的藥物有磺胺類藥、抗球蟲藥、土霉素、痢特靈等。用藥時(shí)一定要根據(jù)病情準(zhǔn)確把握藥物劑量,同時(shí)務(wù)必將藥物和飼料混合均勻。
(3)口服。此法一般適用于個(gè)別治療,雖費(fèi)時(shí)費(fèi)力,但劑量準(zhǔn)確,治療效果比較確實(shí),當(dāng)病雞食欲下降時(shí)可用此法。
(4)注射。注射治療的優(yōu)點(diǎn)是藥物吸收充分、吸收速度快,適用于逐只治療,尤其是在緊急治療時(shí),效果更好。
(5)外用。體表給藥,多用來殺滅體外寄生蟲或局部創(chuàng)傷治療,常用噴霧、藥浴、外涂等方法。
4.3 掌握用藥的劑量
藥物的劑量應(yīng)根據(jù)病原體對藥物的敏感性、病情程度和病雞體質(zhì)而定。為了達(dá)到預(yù)期的治療效果、減少不良反應(yīng),用藥劑量應(yīng)當(dāng)準(zhǔn)確,并按規(guī)定時(shí)間和次數(shù)給藥。有些藥物的劑量要求比較嚴(yán)格,如呋喃類和磺胺類藥物,劑量稍大即可引起中毒,故應(yīng)嚴(yán)格掌握使用劑量。一般強(qiáng)力霉素、氟苯尼考、氨基糖甙類、粘菌素等屬于濃度依賴性殺菌藥,適合1d給藥1次,全天用量1次投喂有利于提高血藥濃度、縮短達(dá)峰時(shí)間。其他抑菌藥物(如紅霉素、林可霉素等)一般為1d用藥2次,以確保藥物的連續(xù)作用。
任何動(dòng)物疾病的治療,無論選擇中藥或者西藥,都需要一定的療程,切不可用藥兩天見效后立即停止用藥,或者治療無明顯效果立刻換藥,這樣極易產(chǎn)生耐藥性,最后導(dǎo)致無藥可用。生產(chǎn)上實(shí)際治療時(shí),西藥最短要使用3~4d、中藥最短使用4~5d才能產(chǎn)生根本的治療效果,切忌停藥過早而導(dǎo)致疾病復(fù)發(fā)。
4.4 注意藥物的配伍禁忌
在臨床上常采用兩種或兩種以上的藥物進(jìn)行聯(lián)合用藥,起協(xié)同增強(qiáng)藥效的作用,但并不是所有的藥物都可聯(lián)合使用。有的聯(lián)合用藥則相互抵消、拮抗或產(chǎn)生毒副作用,主要有以下幾種情況:一是比預(yù)期的作用更強(qiáng)(協(xié)同作用),如紅霉素和新霉素合用;二是比預(yù)期的作用減弱(拮抗作用),如阿莫西林和強(qiáng)力霉素合用;三是產(chǎn)生意外的毒性反應(yīng),如磺胺類和氟苯尼考合用。
4.5 避免產(chǎn)生抗藥性
小兒感冒初始階段,如流涕、咽痛、聲音嘶啞,服用美撲偽麻、酚麻偽敏、氨酚偽麻等制劑。伴有咳嗽服用美酚偽麻、雙酚偽麻、美息偽麻等。流感一般高熱,服用退熱藥外,還要服用金剛烷胺制劑抗病毒藥物,如復(fù)方氨酚烷胺咖敏膠囊、復(fù)方氨酚烷胺膠囊。緩解鼻塞癥狀,用奈甲唑啉滴鼻劑。服用感冒藥注意事項(xiàng):抗生素對感冒和流感病毒無作用,但感冒時(shí),病毒在咽部繁殖引起咽炎,在肺部繁殖引起肺炎,并發(fā)細(xì)菌感染時(shí)服用抗生素,如氨芐西林、頭孢氨芐、紅霉素、阿奇霉素等。感冒病程多在1周左右,無嚴(yán)重癥狀者可不用或少用藥物,多喝水,注意休息。感冒藥物連服不得超過7 d,服用劑量不得超過推薦量,一周后未緩解,應(yīng)去看醫(yī)生。
腹瀉是小兒常見病,痢疾、大腸埃希菌感染的急性腹瀉,癥狀是膿血便,里急后重,腹痛,首選黃連素。1歲以下1次0.05 g,1~3歲1次0.05~0.1 g,4~6歲1次0.1~0.15 g,7~9歲1次0.15~0.2 g,10~12歲1次0.2~0.5 g,3次/d。由于外界刺激引起激惹性腹瀉,癥狀多為水便,伴有糞便顆粒,下瀉急促,伴有腸鳴音,腹痛劇烈,選用思密達(dá)、蒙脫石,1歲以下每日1袋,2~3歲每日2~3袋,3歲以上每日3袋,分3次服用。消化不良引起的腹瀉證見黃綠色,嬰兒糞便混有奶瓣,服用胰酶制劑。服用腹瀉藥物注意事項(xiàng):腹瀉可致鉀離子丟失,注意補(bǔ)充鉀鹽、水、電解質(zhì);藥用炭(思密達(dá)、蒙脫石)可影響兒童營養(yǎng)吸收,3歲以下兒童長期腹瀉或腹脹禁用,藥用炭不易與維生素、抗生素、生物堿、乳酶生及各種消化酶同時(shí)服用。
便秘也是小兒常見病,低張力性便秘(腸肌、腹壁、膈肌張力無力,通常是軟便,大便時(shí)間較長),用開塞露1次5~10 ml,注入,深度距口3~6 cm。急性便秘,用硫酸鎂,可單獨(dú)使用,或配伍山梨酸和甘油,1次每周歲 1 g,同時(shí)大量飲水。便秘用藥注意事項(xiàng):兒童不易用緩瀉藥,可造成緩瀉藥依賴性便秘,一旦緩解,應(yīng)停用,一般用藥不超過7日。硫酸鎂應(yīng)在清晨空腹服用,需大量飲水,排便反射減弱引起腹脹時(shí),應(yīng)停止使用。
小兒生長發(fā)育階段,用藥遵循以下幾點(diǎn):
①用藥及時(shí),用量宜輕。小兒得病急,變化快,因此用藥要及時(shí),由于小兒臟腑嬌嫩,用量宜輕;
②宜用清輕之品。對大辛、大寒、大熱及攻伐藥物、猛烈藥物要慎用,如必須使用,量要少,中病即止;
甘露醇進(jìn)入血液循環(huán)后主要依靠提高血漿滲透壓,促使腦組織內(nèi)的水分回滲到血管內(nèi),然后通過利尿作用將體內(nèi)水分排出體外而起到脫水的治療作用。
甘露醇進(jìn)人血液循環(huán)后不參加機(jī)體內(nèi)的新陳代謝過程,故無毒;不被機(jī)體分解利用而不降低脫水療效;由于其排泄速度適當(dāng)而能保持較長的藥效時(shí)間;甘露醇本身及其降解物并無毒副作用,故較安全;部分甘露醇雖可從血管內(nèi)彌散至腦組織間隙,但并不進(jìn)入到腦細(xì)胞內(nèi)且不引起顱內(nèi)壓的再次升高(無顱壓反跳)。
另外,甘露醇能擴(kuò)張腎血管,增加腎臟的血流灌注量和減輕腎細(xì)胞水腫:經(jīng)腎小球?yàn)V出的甘露醇不再被腎小管重吸收,而在腎小管內(nèi)維持一定的滲透壓和促使腎小管內(nèi)的水分增加,這不僅能增加腎臟的利尿作用,還可防止急性腎功衰竭的發(fā)生。
由于甘露醇具有上述有利的藥理特性,現(xiàn)其被公認(rèn)為是脫水作用迅速而強(qiáng)大、性能安全而穩(wěn)定、療效確定而可靠、毒副作用較小的首選腦病脫水劑,受到臨床醫(yī)生們的普遍歡迎。
甘露醇的應(yīng)用方法和原則
給藥方法 臨床上常以20%甘露醇(1~2 g/kg)每4~6 h快速靜脈推注或滴注1次。給藥后20 min開始顯效,療效持續(xù)4~6 h,但以給藥后最初2~3 h內(nèi)的藥效作用最強(qiáng)。如患者已發(fā)生顳葉溝回疝,且伴有嚴(yán)重失水或血循環(huán)量過少而尚未被糾正,或伴有心臟功能不全或肺水腫尚無明顯改善者,還可以20%甘露醇(1.0~1.5 mL/kg)于10~15 min內(nèi)由腦疝側(cè)頸動(dòng)脈內(nèi)推注,必要時(shí)2 h后再酌情給藥1次。如無特殊毒副反應(yīng),甘露醇治療應(yīng)持續(xù)至病情基本穩(wěn)定后方可逐漸減少其用藥次數(shù)和劑量,病情完全穩(wěn)定后即可逐漸撒藥。如無特殊需要一般以≤2周為宜。
給藥原則
甘露醇每次給藥劑量必須給足,2次給藥的間隔時(shí)間應(yīng)適當(dāng)而不宜過長,給藥的濃度和速度也必須恰當(dāng),以確保甘露醇的脫水療效。
對急性和嚴(yán)重顱內(nèi)壓增高患者,應(yīng)盡早應(yīng)用甘露醇,特別是對已出現(xiàn)腦疝征象的患者更應(yīng)從早、從快。
在治療全過程中,必須密切觀察血液電解質(zhì)和血漿滲透壓的變化,以便及時(shí)糾正和調(diào)整甘露醇的應(yīng)用劑量。
對心、腎功能不全,肺水腫和高血壓等病的患者,給藥速度與劑量均須嚴(yán)格控制,并應(yīng)嚴(yán)密觀察病情變化,以確?;颊甙踩?。
經(jīng)反復(fù)正規(guī)而足量地使用脫水劑后,臨床療效仍然不佳、病情持續(xù)惡化或腎臟功能出現(xiàn)異常者不宜繼續(xù)拘泥于甘露醇的治療,應(yīng)及時(shí)邀請神經(jīng)外科會診商討開顱減壓術(shù)以利較早地緩解病情。
甘露醇的療效評估標(biāo)準(zhǔn)
下述指標(biāo)可供參考:①治療后患者的脈搏、呼吸、血壓和瞳孔應(yīng)恢復(fù)正常;②意識狀態(tài)、頭痛、嘔吐或抽搐等癥狀應(yīng)明顯改善;③眼球應(yīng)稍下陷,眼球張力和皮膚彈性應(yīng)有減低;④血細(xì)胞比容和血漿滲透壓仍應(yīng)處在偏高水平。
否則,應(yīng)視為脫水療效欠佳或不佳。影響甘露醇療效的主要因素
在一定劑量限度內(nèi),甘露醇的劑量越大療效越佳,療效持續(xù)時(shí)間越長。但超過一定劑量限度(隨個(gè)體差異及顱內(nèi)病變程度而異)后,即使再增大劑量亦不能再提高其療效。
給藥速度越快,脫水效果越好,持續(xù)時(shí)間越長。反之療效較差或不佳。
間隔一定時(shí)間后再次用藥,將有助于藥效的提高和藥效時(shí)間的延長。如在單位時(shí)間內(nèi)持續(xù)重復(fù)用藥,其療效將會降低,藥效持續(xù)時(shí)間將會縮短。
患者的血腦屏障正?;驌p傷較輕者的療效較好,反之療效較差。
甘露醇治療中可能出現(xiàn)的并發(fā)癥及其防治措施
警惕急性循環(huán)衰竭 大劑量快速給予甘露醇后,由于在短時(shí)間內(nèi)血容量的急劇增加,有導(dǎo)致心臟功能不全而發(fā)生急性循環(huán)衰竭的可能性。
防治:在治療中,應(yīng)隨時(shí)注意體液出入量的登記、核實(shí)以及尿比重的檢查,以預(yù)防因一時(shí)補(bǔ)液(含甘露醇)過多過快而引發(fā)危險(xiǎn)。
警惕電解質(zhì)紊亂 甘露醇雖不會影響腎小管對電解質(zhì)的重吸收,但大量脫水后仍可影響血漿電解質(zhì)的濃度,而引發(fā)機(jī)體的電解質(zhì)紊亂。
防治:在治療中應(yīng)隨時(shí)注意電解質(zhì)的核查,如有異常應(yīng)及時(shí)予以糾正。
警惕高滲性昏迷 在反復(fù)大量應(yīng)用甘露醇后,可引起血液過于濃縮、血容量過低或血漿滲透壓過高,而易導(dǎo)致血液循環(huán)量的不足和高滲透壓性昏迷的發(fā)生。
防治:在治療中,應(yīng)加強(qiáng)對病情的觀察和有關(guān)實(shí)驗(yàn)室方面的檢查,以利這類并發(fā)癥的防治。
警惕再次出血 對由腦內(nèi)出血性疾病所致的顱內(nèi)壓增高患者,不宜過分過快地進(jìn)行甘露醇強(qiáng)力脫水,以免原有病情的加重或引發(fā)再次出血。
正確處理甘露醇治療中脫水和補(bǔ)水的矛盾
總體原則 當(dāng)腦水腫尚未完全被控制前,務(wù)必適當(dāng)限制補(bǔ)液量(含甘露醇),使每日液體的總出入量維持在負(fù)平衡狀態(tài),即液體出量大于入量,以確保甘露醇的脫水療效。如腦水腫已基本被控制,則每日液體總出入量應(yīng)基本持平,即液體出入量基本相等,以保證機(jī)體代謝過程的正常進(jìn)行。
如一旦血容量過低且不足以滿足血液循環(huán)的最低需要跡應(yīng)適時(shí)適量補(bǔ)水以維持血液循環(huán)的最低需要量,但切忌補(bǔ)水過多過快,以免腦水腫再次出現(xiàn)或加重。
補(bǔ)液量計(jì)算 補(bǔ)液的日總量可按下述公式:無形失水量(如通過汗腺和呼吸道等喪失的水分約700 mL,如體溫不斷升高時(shí)還應(yīng)適當(dāng)增加)+尿量+嘔吐物和痰液量一自身代謝的內(nèi)生水(約300 mL)進(jìn)行初步估算。
幾種特殊情況下甘露醇的應(yīng)用 在下述特殊情況下,尤應(yīng)特別注意處理好甘露醇治療中脫水和補(bǔ)水間的矛盾,以提高和保證療效。具體措施如下。
不論有無腦疝形成而伴有中樞性呼吸衰竭時(shí)應(yīng)“快脫慢補(bǔ)”,直至腦疝危象解除,或呼吸功能和意識障礙明顯改善時(shí),再酌情補(bǔ)給膠體液體。
已有腦疝形成而伴有因腦疝引起的繼發(fā)性低血壓所致中樞性休克時(shí),應(yīng)“快脫慢補(bǔ)”,力求快速脫水和降低顱內(nèi)壓力以利極早地解除腦疝。同時(shí)加用速效升壓藥、強(qiáng)心藥和適當(dāng)補(bǔ)給膠體液體,盡快提高血壓和保證腦血流的正常灌注。
腦水腫且伴有明顯失水時(shí),應(yīng)“慢脫慢補(bǔ)”。每日液體總?cè)肓靠陕源笥谥辛?,補(bǔ)液宜慢和讓患者仍須處于輕度失水狀態(tài)。對這類患者,如按以往慣例過快過多地補(bǔ)液,??杉又啬X水腫和原有病情,值得注意:
腦水腫且伴有心衰、肺水腫或心肌炎時(shí),應(yīng)先給予利尿、強(qiáng)心藥以穩(wěn)定細(xì)胞膜功能,然后再“慢脫慢補(bǔ)”。一般可先給予呋塞米或地塞米松等藥物,待心、肺功能好轉(zhuǎn)后才靜脈滴注甘露醇藥以側(cè)重降低顱內(nèi)壓,并適當(dāng)?shù)芈a(bǔ)液體和電解質(zhì)以改善心肺功能。
腦水腫且伴有腎功能不全時(shí),一般以不用甘露醇強(qiáng)力脫水劑為宜,以避免加重對腎功能的損傷。而應(yīng)先按尿量、尿常規(guī)和尿素氮的檢查結(jié)果給予適量利尿劑幫助排尿,然后進(jìn)行“慢脫慢補(bǔ)”。
腦水腫且伴有嚴(yán)重冠心病、腦動(dòng)脈硬化、高血脂和紅細(xì)胞增多癥時(shí),應(yīng)“邊脫邊補(bǔ)”。因脫水可使血液黏度增高、血流速度減慢、局部性的凝血因子積聚與血細(xì)胞比容數(shù)值的上升,而易引起心肌梗死、腦梗死的急性發(fā)生和原有病情的加重。這類病例臨床上并非少見,故應(yīng)在甘露醇治療的同時(shí),適當(dāng)?shù)匮a(bǔ)給706羧甲淀粉或低分子右旋糖酐等液體,使血細(xì)胞比容維持
腦水腫已被控制而伴有失水時(shí),一般應(yīng)“多補(bǔ)少脫”,但補(bǔ)水要慢,且邊補(bǔ)邊看,一旦失水得到糾正,即轉(zhuǎn)入“邊補(bǔ)邊脫”原則。
腦水腫,已被控制而伴有血漿高滲透壓狀態(tài)時(shí),應(yīng)先“多補(bǔ)少脫”,等血漿高滲透樂狀態(tài)獲得糾正后,再根據(jù)病情和按“慢脫慢補(bǔ)”原則繼續(xù)使用甘露醇,維持原有脫水效果。
不推薦甘露醇用作預(yù)防腦水腫。
對甘露醇的使用時(shí)機(jī)還沒有統(tǒng)一的觀點(diǎn),還有待于大規(guī)模的前瞻性研究
中圖分類號:F41 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
呼石化聚丙烯裝置催化劑計(jì)量系統(tǒng)中,有兩種助劑采用型號為:PULSAFEEDER 880-S-AP的液壓雙隔膜計(jì)量泵加入到反應(yīng)器。其中P101A/B輸送的介質(zhì)TEAL(三乙基鋁)為遇空氣著火、遇水爆炸的危險(xiǎn)化學(xué)品;P104A/B輸送的介質(zhì)DONOR(環(huán)己基甲基二甲氧基硅烷)也是不能隨意排放到環(huán)境中的化學(xué)品。介于這幾臺泵輸送介質(zhì)的危險(xiǎn)性和兩臺泵在裝置中的關(guān)鍵性。能否快速排除故障并且減少泵頭不必要的拆解,對于裝置的長周期運(yùn)行、安全生產(chǎn)有著重要的意義
1 計(jì)量泵工作原理簡介
PULSAFEEDER 880-S-AP計(jì)量泵大體由電機(jī)、傳動(dòng)機(jī)構(gòu)、泵頭組件、氣動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)組成。泵工作時(shí),電機(jī)驅(qū)動(dòng)蝸桿轉(zhuǎn)動(dòng),帶動(dòng)渦輪和偏心輪轉(zhuǎn)動(dòng);偏心輪作用到柱塞(滑桿),同時(shí)在復(fù)位彈簧的作用下實(shí)現(xiàn)柱塞(滑桿)的往復(fù)運(yùn)動(dòng);液壓腔中液壓油的體積隨著柱塞(滑桿)的往復(fù)運(yùn)動(dòng)增大、減小,從而帶動(dòng)膜片來回鼓動(dòng),通過泵頭出入口單向閥與之相配合的啟閉,實(shí)現(xiàn)吸排的過程,達(dá)到輸送液體的功能。計(jì)量泵流量的調(diào)節(jié),通過DCS給出信號改變供給氣動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)的儀表風(fēng)壓力,來改變限位桿的位置,限制柱塞(滑桿)復(fù)位的位置,從而改變了柱塞(滑桿)往復(fù)運(yùn)動(dòng)的行程,達(dá)到改變計(jì)量泵流量的目的。
2 常見故障原因分析和應(yīng)對措施
2.1 泵出口流量下降或不上量
2.1.1入口過濾器堵塞
呼石化聚丙烯為新開工裝置,在開工前的設(shè)備管線吹掃過程中容易出現(xiàn)部分管線設(shè)備出現(xiàn)吹掃不徹底,殘留有焊渣、鐵銹等雜質(zhì),從而造成過濾器使用一段時(shí)間后發(fā)生堵塞現(xiàn)象。如果將入口過濾器跨線閥打開,過濾器出入口閥門關(guān)閉,計(jì)量泵流量恢復(fù)正常,可以判斷流量降低是由過濾器堵塞造成的。將過濾器隔離、油洗干凈后,拆清過濾器即可解決。如有機(jī)會,要重新油洗過濾器前管線以及儲罐,以避免過濾器頻繁堵塞。
2.1.2補(bǔ)油閥損壞或堵塞
泵正常工作時(shí),液壓腔內(nèi)充滿液壓油。當(dāng)腔內(nèi)液壓油不足時(shí),油箱內(nèi)的液壓油會通過補(bǔ)油閥自動(dòng)向液壓腔補(bǔ)油,如果補(bǔ)油閥損壞,就會導(dǎo)致液壓腔中液壓油不足,造成膜片運(yùn)動(dòng)幅度減小或不運(yùn)動(dòng),從而引起泵流量下降或不上量。停泵后,拆下補(bǔ)油閥檢查補(bǔ)油閥是否損壞或堵塞,更換或清理補(bǔ)油閥即可排除故障。如補(bǔ)油閥堵塞,清理完后要檢查液壓油箱中油是否干凈,如油箱中的油已經(jīng)渾濁,必須更換液壓油,同時(shí)要排查油渾濁的原因。檢查蝸桿和與之捏合的齒輪是否磨損,柱塞以及填料密封是否磨損、損壞。
2.1.3排氣閥堵塞
排氣閥堵塞后,液壓腔內(nèi)的氣體無法排出,將會導(dǎo)致膜片鼓動(dòng)幅度減小,導(dǎo)致泵的流量降低。特別是在檢修時(shí)將液壓油腔內(nèi)的液壓油全部排放,向液壓油腔內(nèi)充注液壓油時(shí)如果排氣閥堵塞,很容易導(dǎo)致液壓油腔內(nèi)殘存氣體不能完全充滿液壓油,導(dǎo)致計(jì)量泵量不足或不上量。在向液壓腔充注液壓油時(shí)最好將排氣閥拆除,手動(dòng)盤車將液壓腔中的氣體排凈后再回裝排氣閥。
2.1.4安全閥故障,設(shè)定值降低
當(dāng)安全泄壓閥設(shè)定值低于或接近泵的出口壓力時(shí),就會使液壓腔和液壓油箱之間的液壓油短路循環(huán),致使隔膜不工作或鼓動(dòng)幅度減小,導(dǎo)致泵不上量或不足,這時(shí)要重新設(shè)定泄壓閥的壓力,或者更換損壞的安全閥。
2.1.5出入口單向閥密封效果不好
當(dāng)介質(zhì)中雜質(zhì)較多時(shí),有可能將出入口單項(xiàng)閥閥座密封面磨損或者單向閥中的小球磨損,或者有細(xì)小的雜質(zhì)粘附在密封面上,導(dǎo)致出入口單向閥密封效果不好或密封失效,造成泵出口流量減小或不上量。如懷疑這種情況發(fā)生,需切換泵后用大量沖洗油沖洗泵頭,如不能解決,需拆檢出入口單向閥。
2.1.6柱塞填料密封泄漏或填料壓蓋松動(dòng)
柱塞填料密封泄漏后,導(dǎo)致液壓腔中的液壓油向密封油箱中泄露,造成隔膜鼓動(dòng)幅度減小,泵出口流量減小??梢源蜷_密封油箱頂蓋,觀察填料密封是否泄漏,填料壓蓋松動(dòng)是否松動(dòng),如填料密封處泄漏,停泵后更換填料或緊固填料壓蓋。
2.2 出口流量、壓力波動(dòng)增大
2.2.1出口蓄能器壓力不足或氣囊破裂
計(jì)量泵的出口管線上配有蓄能器(阻尼器),以減弱泵出口流量、壓力的脈動(dòng),當(dāng)蓄能器中氣體壓力不足或者氣囊破裂都會導(dǎo)致蓄能器緩沖效果減弱,出口流量、壓力波動(dòng)將會增大。首先要用專用工具檢查蓄能器中的氮?dú)鈮毫κ欠襁_(dá)到了要求值,如壓力不足要及時(shí)補(bǔ)充高純氮?dú)獾揭髩毫?;如果蓄能器中氣體的壓力始終不能補(bǔ)充到要求的壓力且和壓力始終接近泵的出口壓力,說明蓄能器氣囊破裂。
2.2.2兩隔膜間真空狀態(tài)失效
雙隔膜計(jì)量泵的兩個(gè)隔膜之間有一定的真空度,以保證兩隔膜能貼合在一起。兩隔膜之間設(shè)有壓力表來監(jiān)測其壓力。如果兩隔膜之間的真空狀態(tài)失效,有空氣進(jìn)入,也會導(dǎo)致泵出口流量、壓力不穩(wěn)定。當(dāng)內(nèi)操發(fā)現(xiàn)泵出口壓力、流量不穩(wěn)定后,應(yīng)通知外操到現(xiàn)場檢查兩隔膜之間的壓力。如果兩隔膜之間真空度失效,用專用工具將將其抽到要求的真空度范圍,查找真空度失效的原因排除故障。一般真空度失效是由引壓管和泵頭螺紋連接處漏氣引起。
2.2.3氣動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)不穩(wěn)定,沖程波動(dòng)較大
該計(jì)量泵在呼石化聚丙烯裝置的使用過程中,氣動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)不是很穩(wěn)定,大部分出口流量不穩(wěn)定是由于調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)不穩(wěn)定造成泵的沖程波動(dòng),從而導(dǎo)致泵的流量波動(dòng)較大。出現(xiàn)這種情況,要及時(shí)通知專業(yè)的儀表維修人員處理,來排除故障。
2.3出口壓力不起或達(dá)不到工藝要求
2.3.1 出入口單向閥密封嚴(yán)重?fù)p壞
泵出入口單向閥出現(xiàn)密封效果下降的現(xiàn)象后表現(xiàn)為泵的出口流量下降,如不及時(shí)處理,當(dāng)密封失效時(shí),介質(zhì)將會在出入口之間循環(huán),泵的出口壓力急速下降達(dá)不到工藝要求。出入口單向閥密封失效一般有兩個(gè)原因造成:(1)使用時(shí)間過長,閥門中的小球以及密封面磨損;(2)介質(zhì)太臟,造成單向閥組件密封失效,或單向閥內(nèi)聚集了大量雜質(zhì),小球不能正常復(fù)位。
2.3.2復(fù)位彈簧組件固定螺釘脫落或斷裂
復(fù)位彈簧組件固定螺釘脫落或斷裂后,導(dǎo)致柱塞不能正常復(fù)位,膜片停止鼓動(dòng)。如果運(yùn)行過程中出現(xiàn)出口壓力突然下降,現(xiàn)場聽不到彈簧復(fù)位時(shí)撞擊限位桿時(shí)發(fā)出的"鏗鏗"的聲音,可以斷定柱塞無法復(fù)位,必須打開液壓油向頂蓋檢查固定螺釘是否脫落或斷裂。
3 使用過程中的注意事項(xiàng)
3.1泵頭拆解時(shí)的安全問題
聚丙烯裝置計(jì)量泵輸送的介質(zhì)為危險(xiǎn)化學(xué)品,特別是P101A/B輸送的TEAL與空氣著火,遇水爆炸,如果處理不干凈拆解泵頭時(shí)很容易造成人員傷亡。拆解泵頭前必須保證泵出入口截?cái)嚅y之間的管線、工作腔用工業(yè)白油清洗干凈,不能有殘留。要做到系統(tǒng)油洗干凈必須注意以下幾點(diǎn):(1)必須保證沖洗油供應(yīng)正常,沖洗前要檢查供油泵油泵是否啟動(dòng),出口壓力是否正常,同時(shí)確認(rèn)沖洗油流程打通;(2)設(shè)定好沖洗流量開始沖洗時(shí),要現(xiàn)場確認(rèn)沖洗氣動(dòng)閥的確已經(jīng)打開,通過管線的震動(dòng)等情況確認(rèn)沖洗油有流量,沖洗氣動(dòng)閥關(guān)閉后要確認(rèn)累加流量計(jì)顯示值降到零;(3)確保沖洗油的量足夠。
3.2不能忽視兩膜片之間壓力的監(jiān)測
雙隔膜計(jì)量泵的兩個(gè)隔膜之間的壓力表正常情況下顯示值為負(fù)值,當(dāng)壓力表顯示壓力突然增大時(shí),說明有一個(gè)隔膜破裂,這時(shí)壓力表測得的壓力為液壓油或介質(zhì)的壓力。出現(xiàn)這種情況后應(yīng)該立即停泵。如繼續(xù)使用一旦另一個(gè)膜片破裂將會導(dǎo)致輸送介質(zhì)介入到液壓油箱污染液壓油,如果是輸送TEAL的P101A/B將會引起火災(zāi)等事故。由于該壓力沒有接入到DCS、沒有報(bào)警,同時(shí)也是外操巡檢過程中容易忽視的點(diǎn),所以在日常使用過程中加強(qiáng)對此壓力的監(jiān)測。
3.3關(guān)注氣動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)是否穩(wěn)定
呼石化聚丙烯裝置隔膜泵使用過程中,最大的問題是氣動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)不穩(wěn)定,經(jīng)常出現(xiàn)沖程上下波動(dòng)、沖程突然增大或減小、沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)失靈等現(xiàn)象。裝置經(jīng)常因?yàn)橛?jì)量泵沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)不穩(wěn)定造成生產(chǎn)波動(dòng),產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定。為了防止沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)故障導(dǎo)致裝置生產(chǎn)波動(dòng)或中斷,我們通過改造,給每臺泵加裝了簡單的手動(dòng)沖程調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu),防止氣動(dòng)調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)故障短時(shí)間內(nèi)不能恢復(fù)時(shí),臨時(shí)用手動(dòng)調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)調(diào)節(jié)泵的流量,保證生產(chǎn)不會被迫中斷。
結(jié)語
雙隔膜計(jì)量泵是Spheripol-Ⅱ代聚丙烯工藝技術(shù)中的一個(gè)關(guān)鍵設(shè)備,關(guān)系到裝置能否長周期安全平穩(wěn)運(yùn)行。以上是呼石化聚丙烯裝置從開工以來,不斷總結(jié)積累的一些經(jīng)驗(yàn),旨在能及早發(fā)現(xiàn)、處理計(jì)量泵故障,將故障消滅在萌芽狀態(tài),提高故障處理效率,不斷的提高催化劑計(jì)量系統(tǒng)運(yùn)行的穩(wěn)定性,逐步減少生產(chǎn)事故,杜絕安全事故的發(fā)生。
Effect of Aminopeptidase Inhibitor on Differentiation Induction Activity of All-trans Retinoic Acid in Human Acute Promyelocytic Leukemia NB4 Cells and Its Mechanism
Abstract
This study was purposed to investigate whether aminopeptidase inhibitor,bestatin,can potentiate all-trans retinoic acid (ATRA)-inducing differentiation in NB4 cells,and to explore its mechanism. The NB4 cells were exposed to either bestatin and ATRA alone or in combination,the morphological changes of NB4 cells were observed by optical microscopy,the CD11b expression was measured by flow cytometry,the function of defferentiation cells was analyzed by nitroblue-tetrazolium (NBT) reduction assay,the mRNA expressions of c-myc and c-EBPε in NB4 cells were detected by RT-PCR,the c-Myc protein expression was determined by Western blot. The results showed that treatment with bestatin alone induced no significant changes in morphology,NBT reduction activity and CD11b expression in NB4 cells. NB4 cells incubated with 10 nmol/L ATRA plus 100 μg/ml bestatin showed more morphologic feature of metamyelocyte and band neutrophil than ATRA alone treated cells. 100 μg/ml bestatin enhanced the NBT reduction activity in NB4 cells induced by various concentrations of ATRA (10,20,40 nmol/L). The effects of various concentrations of ATRA in combination with 100μg/ml bestatin were statistically different from the effect of ATRA alone (P
Key words bestatin; ATRA; cell line,NB4; differentiation
氨肽酶抑制劑烏苯美司(bestatin)能抑制氨肽酶N/CD13和亮氨酸氨基肽酶活性,通過增強(qiáng)宿主免疫功能及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等發(fā)揮抗腫瘤作用[1,2]。有研究提示,bestatin能夠誘導(dǎo)U937細(xì)胞的分化[1],國內(nèi)未見報(bào)道。我們以NB4細(xì)胞為研究對象,通過形態(tài)、功能和表面分化抗原等多層次實(shí)驗(yàn)研究,了解bestatin是否能誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化及(或)對ATRA的誘導(dǎo)分化作用的增強(qiáng)效應(yīng),并初步探討其可能的機(jī)理。
材料和方法
主要試劑
Bestatin、ATRA均購于Sigma公司。bestatin以無菌去離子水溶解為1 mg/ml,分裝之后-20℃保存;ATRA以無水乙醇溶解成10-5 mol/L的儲存液,4℃避光保存,使用時(shí)用RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)液將其稀釋為相應(yīng)工作濃度。NBT為BBI公司產(chǎn)品,以PBS配成0.1%溶液,過濾除菌后4℃避光保存,使用前1周內(nèi)配制。RPMI 1640為Gibco公司產(chǎn)品。胎牛血清為JRH公司產(chǎn)品。CD11b-FITC標(biāo)記單克隆抗體為Teotech公司產(chǎn)品。CD13-PE標(biāo)記單克隆抗體為Becton Dickinson公司產(chǎn)品。TRIzoL試劑為Gibco公司產(chǎn)品,M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq DNA合成酶為Promega公司產(chǎn)品。鼠抗人c-Myc單克隆抗體(c-33)及羊抗人β-Actin多克隆抗體(I-19)均為Santa Cruz公司產(chǎn)品,使用時(shí)以TBST液分別按1∶500和1∶1 000稀釋。ECL顯色液為Santa Cruz公司產(chǎn)品。
細(xì)胞培養(yǎng)及藥物處理
人APL細(xì)胞株NB4細(xì)胞(浙江大學(xué)腫瘤研究所惠贈(zèng))及人髓細(xì)胞白血病細(xì)胞株HL-60細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)液中,置37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),2-3天傳代1次。實(shí)驗(yàn)時(shí)取對數(shù)生長期的細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度為7×104/ml,以不同濃度ATRA和bestatin單獨(dú)或聯(lián)合處理,于不同時(shí)間收集細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
取空白對照組及藥物處理各組細(xì)胞懸液,離心,制備涂片,瑞氏-姬姆薩染色,用光學(xué)顯微鏡(Leica,40×10)觀察細(xì)胞形態(tài)。
四氮唑藍(lán)(nitroblue-tetrazolium,NBT)還原實(shí)驗(yàn)
按文獻(xiàn)[3]報(bào)道的方法進(jìn)行??瞻讓φ战M及藥物處理各組細(xì)胞與NBT共孵育后,制備涂片,瑞氏-姬姆薩染色,光學(xué)顯微鏡下(100×10)觀察,胞漿內(nèi)含有藍(lán)黑色顆粒者為陽性細(xì)胞,隨機(jī)計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞,計(jì)算陽性細(xì)胞百分率。
細(xì)胞表面分化抗原CD11b和CD13的檢測
取對數(shù)生長期HL-60細(xì)胞和NB4細(xì)胞或藥物處理后各組NB4細(xì)胞離心,用PBS(pH 7.4)洗滌,調(diào)整細(xì)胞數(shù)為2×105/50 μl,加CD13-PE標(biāo)記單克隆抗體8 μl或CD11b-FITC標(biāo)記單克隆抗體5 μl,避光孵育30分鐘,用PBS洗滌,上流式細(xì)胞儀檢測。以Cellquest 1.2軟件進(jìn)行分析。
細(xì)胞總RNA提取和RT-PCR反應(yīng)
總RNA提取 用TRIzoL一步法抽提細(xì)胞總RNA,按試劑說明書操作。甲醛變性凝膠電泳證實(shí)為完整RNA,紫外分光光度儀定量,A260 nm/280 nm比值均在1.8-2.0之間。
逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
樣品總RNA 4 μg及隨機(jī)引物0.5 μg,70℃ 5分鐘,立即冰浴,離心。依次加5×逆轉(zhuǎn)錄酶緩沖液5 μl、10 mmol/L dNTP 1.25 μl、M-MLV 200 U,RNase抑制劑0.6 μl,DEPC水補(bǔ)至反應(yīng)體積為25 μl,于27℃10分鐘,37℃ 60分鐘,72℃ 10分鐘滅活逆轉(zhuǎn)錄酶,冰浴1分鐘,結(jié)束反應(yīng)。
PCR反應(yīng)
PCR引物為上海Sangon公司合成。引物序列、反應(yīng)條件及產(chǎn)物大小見表1。反應(yīng)體系包括逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物2 μl、10×PCR緩沖液2.5 μl、25 mmol/L MgCl2 1.5 μl、10 mmol/L dNTP 0.5 μl、25 μmol/L(c-myc與c-EBPε)或2.5 μmol/L(β-actin)上游及下游引物各0.5 μl、Taq DNA聚合酶1U,用滅菌去離子水補(bǔ)至終體積為25 μl。預(yù)實(shí)驗(yàn)確定產(chǎn)物與循環(huán)之間呈線性關(guān)系范圍。取5 μl反應(yīng)產(chǎn)物在15 g/L瓊脂糖凝膠(含0.5 μg/ml溴化乙錠)電泳,電場強(qiáng)度5 V/cm,紫外燈下觀察電泳結(jié)果,用凝膠成像系統(tǒng)(BIO-RAD公司)掃描分析條帶灰度,以目的基因與β-actin的灰度比做半定量分析。Table 1. Sequences of primers,condition of PCR and sizes of PCR products(略)
Western blot
收集藥物處理各組細(xì)胞(細(xì)胞數(shù)為2×106/ml),預(yù)冷的PBS漂洗2次,重懸于100 μl Lammiulis上樣緩沖液(0.125 mmol/L Tris-HCl,pH 6.8,4%SDS,5%甘油)中,超聲波裂解,于4℃離心13 000×g)15分鐘,收集上清,蛋白樣品保存于-80℃。按蛋白定量試劑盒(Bio-Rad公司)操作說明書進(jìn)行蛋白定量,在10%聚丙烯酰胺凝膠電泳、轉(zhuǎn)膜,轉(zhuǎn)移后的硝酸纖維素膜以5%脫脂奶粉封閉1小時(shí),分別與抗人c-Myc和抗人β-actin抗體及辣根過氧化酶標(biāo)記的二抗孵育。ECL顯色,顯影于膠片。圖像分析處理系統(tǒng)(Image Station 2000R)掃描,測定條帶的面積和灰度,以二者之乘積進(jìn)行半定量比較分析。
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理
各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次以上,以X±D表示,多組間比較F檢驗(yàn)后采用方差分析及Tukey檢驗(yàn)。相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)。應(yīng)用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果
NB4細(xì)胞表面有CD13的表達(dá)
NB4細(xì)胞CD13陽性表達(dá)率為94.79%(平均熒光強(qiáng)度為1739.59),對照組HL-60細(xì)胞CD13陽性表達(dá)率為95.49%(平均熒光強(qiáng)度為3107.49)。兩者的CD13平均熒光強(qiáng)度有一定的差異,但陽性百分率差異不明顯。
Bestatin與ATRA聯(lián)合處理后NB4細(xì)胞形態(tài)改變明顯
100 μg/ml bestatin單獨(dú)作用72小時(shí)后,NB4細(xì)胞形態(tài)無明顯改變。10 nmol/L ATRA單獨(dú)作用72小時(shí)后,NB4細(xì)胞呈現(xiàn)部分分化的形態(tài),細(xì)胞核/漿比例減小,核變小有凹陷。100 μg/ml bestatin與10 nmol/L ATRA聯(lián)合處理72小時(shí)后,NB4細(xì)胞形態(tài)分化更加明顯,細(xì)胞漿內(nèi)空泡增多,核凹陷、扭曲更加明顯,形態(tài)似晚幼粒及桿狀核粒細(xì)胞的細(xì)胞增多(圖1)。
Bestatin與ATRA聯(lián)合應(yīng)用后NB4細(xì)胞NBT還原能力明顯增加
以一定濃度(50、75和100 μg/ml)bestatin單獨(dú)處理72小時(shí)后,NB4細(xì)胞的NBT還原能力無明顯改變(與空白對照組相比較,P>0.05);不同濃度(10、20和40 nmol/L)ATRA作用72小時(shí)后,NB4細(xì)胞的NBT還原能力呈濃度依賴性增加,與空白對照組相比,差異明顯。100 μg/ml bestatin與不同濃度ATRA聯(lián)合處理72小時(shí)后,NB4細(xì)胞的NBT陽性率明顯地提高,與單用相應(yīng)濃度ATRA組相比,差異顯著(表2)。Table 2. Effect of bestatin on the NBT reduction activity of NB4 cells induced by ATRA. (略)
100 μg/ml bestatin單獨(dú)處理細(xì)胞不同時(shí)間(48小時(shí)-96小時(shí)),NB4細(xì)胞的NBT還原能力改變不明顯(與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)空白對照組相比,P>0.05);10 nmol/L ATRA處理細(xì)胞至72小時(shí),開始出現(xiàn)NB4細(xì)胞NBT還原能力的增強(qiáng),并呈時(shí)間依賴性,與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對照組相比,有明顯差異;而10 nmol/L ATRA與100 μg/ml bestatin聯(lián)合處理48小時(shí),就出現(xiàn)NB4細(xì)胞NBT還原能力的明顯增強(qiáng),且此作用隨時(shí)間延長而明顯增強(qiáng),與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)單用10 nmol/L ATRA組相比,差異顯著(圖2)。
Bestatin與ATRA聯(lián)合處理后NB4細(xì)胞CD11b表達(dá)明顯增強(qiáng)
100 μg/ml bestatin單獨(dú)處理72小時(shí)后,NB4細(xì)胞CD11b陽性表達(dá)率(MFI為13.4±0.6)稍有增加,但與對照組(MFI為12.3±0.9)相比,差異不顯著(P>0.05)。10 nmol/L ATRA單獨(dú)處理72小時(shí)之后,NB4細(xì)胞CD11b陽性表達(dá)率(MFI為19.2±4.2)明顯提高,與對照組相比,差異顯著(P
Bestatin和ATRA單獨(dú)及聯(lián)合處理后NB4細(xì)胞c-EBPε mRNA表達(dá)的變化
NB4細(xì)胞低表達(dá)c-EBPε mRNA。10 nmol/L ATRA處理12小時(shí)之后,NB4細(xì)胞c-EBPε mRNA表達(dá)水平明顯提高,與對照組相比較,差異顯著(P
Bestatin和ATRA單獨(dú)及聯(lián)合處理后NB4細(xì)胞c-myc表達(dá)的變化
NB4細(xì)胞c-myc mRNA呈高水平表達(dá)。10 nmol/L ATRA單獨(dú)處理4小時(shí)后,NB4細(xì)胞c-myc mRNA表達(dá)下降,與空白對照組相比較,差異明顯(P
Figure 4. Effect of bestatin and ATRA on the expression of c-myc mRNA of NB4 cells after treatment for 4 hours. M: marker; Lane 1: control. Lane 2: bestatin (100 μg/ml). Lane 3: ATRA (10 nmol/L). Lane 4: bestatin (100 μg/ml) +ATRA (10 nmol/L).
NB4細(xì)胞c-Myc蛋白呈高表達(dá)。10 nmol/L ATRA單獨(dú)處理8小時(shí)后,NB4細(xì)胞c-Myc蛋白表達(dá)水平明顯下降(P
討 論
ATRA對APL的有效治療是白血病誘導(dǎo)分化治療的成功典范。但單用ATRA治療易復(fù)發(fā)及產(chǎn)生耐藥,與其他化療藥物聯(lián)用時(shí)療效有一定的提高,但毒副反應(yīng)增加。因此,尋找能夠增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)分化作用而毒副反應(yīng)輕的藥物,成為臨床治療中的關(guān)注問題之一[7,8]。最近,Hirano等[7]根據(jù)NBT還原實(shí)驗(yàn)結(jié)果提出,bestatin可能增強(qiáng)ATRA對NB4細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用,但未做進(jìn)一步的研究。本研究通過對細(xì)胞形態(tài)、功能和表面分化抗原等多層次的檢測及分析對比,表明一定濃度范圍的bestatin本身不能誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化,但確能增強(qiáng)ATRA對NB4細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用。
Hirano等[7]認(rèn)為,bestatin增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)分化作用可能與其抑制細(xì)胞表面CD13活性有關(guān)。本研究結(jié)果顯示,與HL-60細(xì)胞相似,NB4細(xì)胞表面CD13陽性表達(dá)率高達(dá)94.79%,該藥是否通過抑制CD13表達(dá)從而增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化的作用,尚待進(jìn)一步研究證實(shí)。髓系祖細(xì)胞定向分化受轉(zhuǎn)錄因子活性的調(diào)節(jié)。ATRA調(diào)節(jié)與髓細(xì)胞定向分化有關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)誘導(dǎo)APL細(xì)胞向中性粒細(xì)胞分化。氨基肽酶N/CD13為Ⅱ型跨膜蛋白,胞內(nèi)端只有8-10個(gè)氨基酸,但最近研究報(bào)道,CD13分子能夠直接參與細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程[9]。因此,本研究從藥物對轉(zhuǎn)錄因子影響的角度對氨肽酶、抑制劑bestatin增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)分化作用的可能機(jī)制進(jìn)行了初步探索。c-EBPε為C-EBP家族轉(zhuǎn)錄因子之一,ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞向中性粒細(xì)胞方向分化時(shí),藥物作用2小時(shí),c-EBPε mRNA表達(dá)水平即開始增高,并持續(xù)增高至細(xì)胞終末分化[10]。而酪氨酸激酶抑制劑STI571增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞向中性粒細(xì)胞分化時(shí),c-EBPε基因及蛋白的表達(dá)水平均未進(jìn)一步增高[8]。本研究結(jié)果顯示,10 nmol/L ATRA處理12小時(shí)后,NB4細(xì)胞c-EBPε mRNA表達(dá)水平明顯上升,而100 μg/ml bestatin與ATRA聯(lián)合處理NB4細(xì)胞時(shí),c-EBPε mRNA表達(dá)卻未進(jìn)一步增強(qiáng)。這提示bestatin可能與STI571相似,其增強(qiáng)ATRA對NB4細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用可能不是通過調(diào)節(jié)c-EBPε表達(dá)。
原癌基因c-myc表達(dá)異常與髓細(xì)胞性白血病的發(fā)生有關(guān),抑制c-myc表達(dá)可以促使白血病細(xì)胞分化及誘導(dǎo)細(xì)胞終末分化后的凋亡。本研究結(jié)果顯示,10 nmol/L ATRA單獨(dú)作用能夠使NB4細(xì)胞c-myc的表達(dá)下調(diào),這與文獻(xiàn)報(bào)道相似[11]。同時(shí),bestatin與ATRA聯(lián)合應(yīng)用時(shí)c-myc表達(dá)水平的下調(diào)作用較單用ATRA時(shí)更加明顯,且藥物聯(lián)合應(yīng)用各組細(xì)胞的c-myc蛋白表達(dá)水平與藥物誘導(dǎo)的NBT還原能力之間呈明顯的負(fù)相關(guān)。這提示bestatin可能通過與ATRA協(xié)同下調(diào)c-myc表達(dá),從而增強(qiáng)ATRA誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化的作用。1,25-(OH)2 D3在誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞分化時(shí),激活蛋白激酶C,引起c-myc表達(dá)下調(diào)[12]。bestatin是否也通過激活蛋白激酶C增強(qiáng)ATRA下調(diào)c-myc的表達(dá),這有待進(jìn)一步研究證實(shí)。
【參考文獻(xiàn)】
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6林茂芳,俞靜,嚴(yán)力行. 可溶性抗CD47單抗對人樹突細(xì)胞分化與功能的影響. 中華血液學(xué)雜志,2004; 25: 709-712
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低速離心機(jī)操作規(guī)程
2.
微柱孵育器操作規(guī)程
3.
微柱離心機(jī)操作規(guī)程
4.
海爾冷藏箱操作規(guī)程
5.
消毒機(jī)操作規(guī)程
6.
醫(yī)用血液冷藏箱操作規(guī)程
7.
醫(yī)學(xué)低溫冰箱操作規(guī)程
8.
循環(huán)式水浴恒溫箱操作規(guī)程
9.
移液器操作規(guī)程
10.
顯微鏡操作規(guī)程
11.
血小板振蕩儀操作規(guī)程
12.
血液解凍機(jī)操作規(guī)程
低速離心機(jī)操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范離心機(jī)的使用,保障使用人員的人身安全,避免不安全事故發(fā)生。
2.
范圍
所有血庫工作人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
SC-04
中佳
4.
操作步驟
4.1檢查離心機(jī)放置位置是否是水平的,檢查離心機(jī)內(nèi)有無不應(yīng)當(dāng)有的雜物,
離心管有無破損,確認(rèn)后打開電源。
4.2如果離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)過程中聲音有異常,應(yīng)該立即停止離心并檢查原因。
4.3
以上檢查確認(rèn)后,才能進(jìn)行標(biāo)本離心。
4.4
離心前要對標(biāo)本進(jìn)行配平,啟動(dòng)時(shí)按start鍵,啟動(dòng)時(shí)間為1分鐘,2000轉(zhuǎn)。
4.5
離心時(shí)間到了,儀器自動(dòng)停止下來。
5.注意事項(xiàng)
5.1
使用前一定要按上述操作對離心機(jī)進(jìn)行檢查。
5.2
嚴(yán)禁不配平就進(jìn)行離心
5,.3
離心未停止時(shí),禁止打開離心機(jī)蓋子。
5.4
如果長時(shí)間不用,應(yīng)撥下電源插頭,并用防塵布將機(jī)體蓋好。
6.儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭。
6.2
如果離心過程中有血液管破裂,應(yīng)把離心管拿出來,清理干凈,用2000mg/L有效氯濃度溶液浸泡后再使用
6.3
離心機(jī)每年送質(zhì)檢部門進(jìn)行一次強(qiáng)檢,并保存相應(yīng)報(bào)告十年。
微柱孵育器操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范孵育器使用,延長儀器使用時(shí)間,保證輸血工作的安全進(jìn)行
2.
范圍
血庫工作人員和清潔人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
ID-Incubator37
s
I、伯樂
4.
操作步驟
4.1
打開電源開關(guān),液晶顯示屏顯示start,待溫度升到37℃時(shí)顯示“15:00
37℃”,初始時(shí)間設(shè)定為15min
孵育溫度37℃,(此設(shè)置無法更改),當(dāng)溫度到達(dá)37攝氏度后有提示孵育溫度以到。
4.2
打開蓋板放入微柱凝膠卡,和上蓋板。
4.3
觸按“start”鍵開始倒計(jì)時(shí)運(yùn)行,孵育時(shí)間到達(dá),同時(shí)伴有提示音提示。
4.4
將蓋打開,取出微柱凝膠卡
4.4
下次使用時(shí)只需觀察溫度后按start。
5.
注意事項(xiàng)
5.1
孵育前應(yīng)觀察液晶屏顯示溫度是否到達(dá)37±1.5℃。
5.2
不操作時(shí)應(yīng)合上蓋板,以保持孵育溫度。
5.3
避免短時(shí)間內(nèi)頻繁開動(dòng)電源。
5.4
如果長時(shí)間不用,應(yīng)撥下電源插頭,并用防塵布將機(jī)體蓋好。
6.儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭。
6.2
每月由血庫工作人員用2000mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行內(nèi)部擦拭。
6.3
每年送質(zhì)量部門進(jìn)行溫度強(qiáng)檢一次,并保存相應(yīng)的記錄至少十年。
微柱離心機(jī)操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范微柱離心機(jī)的使用,延長儀器使用時(shí)間,保證輸血工作的安全進(jìn)行
2.
范圍
血庫工作人員和清潔人員
3.儀器型號、廠家
ID-cetrifuge12
s
II、伯樂
4.
操作步驟
4.1
打開電源開關(guān),屏幕顯示
ID-cetrifuge12
s
II
4.2
按stop
open
離心機(jī)蓋子打開
4.3將微柱凝膠卡放入離心機(jī)內(nèi),配平后,按start鍵。
4.4離心結(jié)束后,會有提示音,離心機(jī)蓋子會自己彈開。
4.5
取出微柱凝膠卡,關(guān)好離心機(jī)蓋子。
5.注意事項(xiàng)
5.1
離心時(shí)間和離心轉(zhuǎn)速已經(jīng)設(shè)定好,切記不能同時(shí)按
start和stop
open兩個(gè)鍵,儀器會進(jìn)入出廠化。
5.2
離心時(shí)一定要進(jìn)行配平
5.3
如果離心時(shí)間未結(jié)束,盡量不要中途停止離心
5.4
如果長時(shí)間不用,應(yīng)撥下電源插頭,并用防塵布將機(jī)體蓋好
6.
儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭。
6.2
每月由血庫工作人員用2000mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行內(nèi)部擦拭。
6.3
每年送質(zhì)量部門進(jìn)行離心速度強(qiáng)檢一次,并保存相應(yīng)的記錄至少十年。
海爾冷藏箱操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范冰箱的使用,保證冰箱內(nèi)物品的質(zhì)量。
2.
范圍
血庫工作人員和清潔人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
HYC-68、海爾集團(tuán)
4.
操作步驟
4.1
冰箱內(nèi)放置一個(gè)校準(zhǔn)過的溫度表檢查冰箱溫度是否控制在2-8℃范圍內(nèi)。
4.2
每天記錄冰箱溫度兩次(上午8:30,下午18:00),并記錄在冰箱溫度登記本上。
4.3
溫度超過正常范圍,警報(bào)器會自動(dòng)報(bào)警,需及時(shí)進(jìn)行處理。
5.
注意事項(xiàng)
5.1
每天由夜班人員對冰箱溫度進(jìn)行記錄
5.2
此規(guī)程適用于同型號的冰箱
5.3
從冰箱領(lǐng)取東西出來后,應(yīng)檢查冰箱門是否關(guān)嚴(yán)
5.4
嚴(yán)禁在冰箱內(nèi)存放食物
6.
儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭
6,2
每月由血庫工作人員用500-1000mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行內(nèi)部擦拭
6.3
冰箱使用的溫度計(jì)每年送質(zhì)量部門對溫度進(jìn)行強(qiáng)檢一次,相應(yīng)記錄保存至少十年。
消毒機(jī)操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范消毒機(jī)的使用,保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各個(gè)房間的空氣質(zhì)量
2.
范圍
血庫工作人員和清潔人員
3.
儀器型號、廠家
KDSJ-Y120
、老肯科技
4.
操作步驟
4.1
連接電源線,機(jī)子會進(jìn)入待機(jī)狀態(tài)
4,2
按+鍵,把時(shí)間調(diào)至到2h
4.3
按確認(rèn)鍵,確認(rèn)消毒時(shí)間,然后按開始
4.4
消毒時(shí)間為計(jì)模式,消毒時(shí)間結(jié)束后,儀器會自動(dòng)停止。
5.
注意事項(xiàng)
5.1
禁止在消毒機(jī)上覆蓋任何物品
5.2
盡量選用手動(dòng)消毒模式
5.3
消毒完畢后應(yīng)拔掉儀器電源
5.4
每天的消毒記錄要登記在消毒記錄本上
6.
儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭
6.2
每個(gè)月對出風(fēng)口的濾網(wǎng)進(jìn)行清洗,消毒
醫(yī)用血液冷藏箱操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范冰箱的使用,保證臨床用血的質(zhì)量安全
2.
范圍
血庫工作人員和清潔人員
3.
儀器型號和廠家
HXC-158、海爾集團(tuán)
4.
操作步驟
4.1
冰箱內(nèi)放置一個(gè)校準(zhǔn)過的溫度表檢查冰箱溫度是否控制在2-6℃范圍內(nèi)。
4.2
冰箱溫度由夜班人員每4個(gè)小時(shí)記錄一次(8:30、12:30、16:30、20:30、0:30、4:30)
4.3
如果溫度超出正常范圍內(nèi),警報(bào)器會自動(dòng)報(bào)警,需及時(shí)進(jìn)行處理。
5.
注意事項(xiàng)
5.1
冰箱內(nèi)嚴(yán)禁放置其他物品
5.2
溫度報(bào)警時(shí)必須及時(shí)進(jìn)行查看
5.3
打開冰箱門后關(guān)門時(shí)要檢查門是否關(guān)嚴(yán)
6.
儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭
6.2
每個(gè)星期有血庫人員用500-1000mg/L的有效氯濃度對冰箱內(nèi)壁進(jìn)行擦拭
6.3
儀器使用的溫度計(jì),需要每年送質(zhì)量部門進(jìn)行強(qiáng)檢,相應(yīng)檢查報(bào)告至少保存十年。
6.4
每個(gè)月對冰箱內(nèi)壁進(jìn)行培養(yǎng)一次,相應(yīng)檢查報(bào)告至少保存十年。
醫(yī)學(xué)低溫冰箱操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范冰箱的使用,保證臨床用血的質(zhì)量安全
2.
范圍
血庫工作人員和清潔人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
DW-25W300、海爾集團(tuán)
4.
操作步驟
4.1
冰箱內(nèi)放置一個(gè)校準(zhǔn)過的溫度表檢查冰箱溫度是否控制在-20-25℃范圍內(nèi)。
4.2
溫度記錄冰箱溫度由夜班人員每4個(gè)小時(shí)記錄一次(8:30、12:30、16:30、20:30、0:30、4:30)
4.3
如果溫度超出正常范圍,冰箱會報(bào)警,需及時(shí)進(jìn)行處理
5.
注意事項(xiàng)
5,1
冰箱內(nèi)嚴(yán)禁放置其他物品
5.2
溫度報(bào)警時(shí)必須及時(shí)進(jìn)行查看
5.3
打開冰箱門后關(guān)門時(shí)要檢查門是否關(guān)嚴(yán)
6.
儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭
6.2
每半個(gè)月由血庫人員對低溫冰箱進(jìn)行化霜,消毒用500-1000mg/L的有效氯濃度對冰箱內(nèi)壁進(jìn)行擦拭
6.3
儀器使用的溫度計(jì),需要每年送質(zhì)量部門進(jìn)行強(qiáng)檢,相應(yīng)檢查報(bào)告至少保存十年。
循環(huán)式水浴恒溫箱操作規(guī)程
1.目的
熟悉循環(huán)式水浴恒溫箱的操作,防止不安全事故的發(fā)生
2.范圍
血庫人員和清潔人員
3.儀器型號、生產(chǎn)廠家
420-B、江蘇新康
4.操作步驟
4.1
在水箱內(nèi)加入清潔溫水至總高度的1/2處,連接電源
4.2
按set鍵進(jìn)行溫度設(shè)定,溫度設(shè)定范圍在37℃,到達(dá)設(shè)定溫度后,控制進(jìn)入恒溫狀態(tài)
4.3
每天由夜班人員進(jìn)行溫度記錄(8:30、18:00)
5,注意事項(xiàng)
5.1
嚴(yán)禁水箱在無水下進(jìn)行工作
5.2
清洗水箱時(shí)應(yīng)做好相應(yīng)防護(hù)措施,避免手劃傷
5.3
進(jìn)行水箱清理時(shí)一定要等水溫降下來后再進(jìn)行清洗,避免發(fā)熱管把手燙傷。
6.儀器保養(yǎng)
6.1
每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭
6.2
每個(gè)星期有血庫人員對水箱進(jìn)行清洗換水消毒
6.3
使用溫度計(jì)必須每年送質(zhì)檢部門進(jìn)行強(qiáng)檢一次,相關(guān)記錄至少保存十年。
移液器操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范移液器的使用,保證加樣的準(zhǔn)確性
2.
范圍
血庫工作人員
3.儀器型號、生產(chǎn)廠家
1000ul/20-200ul、DragonLAB
TOP
Pipette
4.
操作步驟
4.1
吸頭安裝:把黑色套筒頂端插入吸頭(無論是散裝吸頭還是盒裝吸頭都一樣),輕輕用力下壓的同時(shí),把手中的移液器按逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)180度。
4.2
容量設(shè)定:正確的容量設(shè)定分為兩個(gè)步驟,一是粗調(diào),即通過排放按鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預(yù)想值,二是細(xì)調(diào),當(dāng)容量值接近自己的預(yù)想值以后,應(yīng)將移液器橫置,水平放至自己眼前,通過調(diào)節(jié)輪慢慢的將容量調(diào)至預(yù)想值。
4.3預(yù)洗吸頭:安裝了心吸頭或增加容量值以后,應(yīng)該吧需要轉(zhuǎn)換的液體吸取。排放兩到三次。
4.4
吸液:將移液器排放按鈕按至第一停點(diǎn),再將吸頭垂直浸入液面。
4.5
放液:放液時(shí)候,吸頭緊貼容器壁,先將排放按鈕按至第一停點(diǎn),略停頓后,再按置第二個(gè)停點(diǎn)。
4.6
卸去吸頭:卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放,一般產(chǎn)生交叉污染
5.
注意事項(xiàng)
5.1
吸頭安裝時(shí),切記不能用力過大,更不能采取剁吸式的方法進(jìn)行吸
安裝。
5.2
吸液時(shí),具體的浸入深度要根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握,平穩(wěn)松開按鈕,切記不能過快
6.儀器保養(yǎng)
6.1
定期清潔我們手中的移液器,用75%的酒精擦拭手柄、彈射器及白套
筒外壁。
6,2
移液器需要每年送質(zhì)檢部門進(jìn)行強(qiáng)檢一次,相關(guān)記錄保存至少十年。
顯微鏡操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范顯微鏡的使用,延長儀器的使用時(shí)間,保證設(shè)備的正常性和檢測結(jié)果準(zhǔn)確性
2、范圍
血庫工作人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
CX22、奧林巴斯
4.
使用步驟
4.1
接好電源線,開啟電源開關(guān)
4.2
瞳距調(diào)節(jié):根據(jù)觀察者兩眼瞳距的大小來調(diào)節(jié)目鏡的距離
4.3
調(diào)焦:現(xiàn)在10倍鏡下找視野,再轉(zhuǎn)到40倍鏡看待查物是否清晰,如果不清晰用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋進(jìn)行微調(diào),直到圖像清晰為止。
4.4
作業(yè)程序:將所需要觀察的標(biāo)本放在載物臺上,上卡夾住,按4.3步驟來進(jìn)行調(diào)節(jié)。
4.5
使用完后把標(biāo)本從載物臺上移下來
5.
注意事項(xiàng)
5.1
使用時(shí)一定要遵循操作步驟進(jìn)行,以免不當(dāng)操作對鏡頭造成損害
5.2
使用完畢后轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋將載物臺下降至底部,將亮度燈調(diào)節(jié)至最小亮度處,最后才關(guān)閉電源。
6.
儀器保養(yǎng)
6.1
定期用95%的酒精對鏡頭進(jìn)行擦拭
6.2
定期用95%酒精對載物臺進(jìn)行擦拭
血小板振蕩儀操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范血小板振蕩儀的操作,保證臨床用血安全
2.
范圍
血庫工作人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
SJW-IA、三江電子科技
4.
操作步驟
4.1
打開儀器電源,儀器進(jìn)入運(yùn)行狀態(tài)。
4.2觀察溫度范圍是否在22℃±2℃,儀器是否在連續(xù)左右往復(fù)工作,是否在
水平振蕩。
4.3以上都確認(rèn)后,方可把血小板放入保存。
5.
注意事項(xiàng)
5.1放入血小板前一定要檢查儀器運(yùn)行是否正常,溫度是否在22℃±2℃內(nèi)
環(huán)境溫度不能超過35℃,不能低于5℃
5.2溫度記錄每天由夜班人員記錄兩次(8:30,18:00)
5.3此儀器溫度比較特殊,必須做好消毒清潔工作
5.4此儀器最好長時(shí)間通電,避免需要使用時(shí)溫度不能達(dá)到使用要求
6.
儀器保養(yǎng)
6.1每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭
6.2使用前后進(jìn)行紫外線消毒
6.3每周由血庫工作人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行內(nèi)部擦拭,并登
記相關(guān)記錄。
血液解凍機(jī)操作規(guī)程
1.
目的
規(guī)范血液解凍機(jī)的操作,保證臨床用血安全
2.
范圍
血庫工作人員
3.
儀器型號、生產(chǎn)廠家
BT-8、上海JOYN
4.
操作步驟
4.1往水箱內(nèi)加到水位線。
4.2設(shè)定溫度,按SET鍵設(shè)定溫度,按或調(diào)節(jié)到所需溫度(一般設(shè)置到
38℃),再一次按SET鍵溫度設(shè)定完畢,開始加熱指示燈亮。
4.3放入需要融化血液前,需檢查水箱溫度是否在37℃。
4.4放入血液后,打開擺幅開關(guān),設(shè)定頻率,儀器開始自動(dòng)搖擺。
4.5使用完畢后,關(guān)掉搖擺開關(guān),減少機(jī)械磨損。
5.
注意事項(xiàng)
5.1此儀器最好長時(shí)間通電,避免需要使用時(shí)溫度不能達(dá)到使用要求。
5.2要隨時(shí)檢查水箱內(nèi)水位線,避免出現(xiàn)干燒情況,確保機(jī)器運(yùn)行正常。
5.3溫度記錄由夜班人員登記兩次(8:30,18:00)。
5.4此儀器溫度比較特殊,必須做好消毒清潔工作。
6.
儀器保養(yǎng)
6.1每天由清潔人員用500mg/L的有效氯濃度溶液進(jìn)行外部擦拭。
2、冰箱使用一段時(shí)間后,可以清理內(nèi)部,可以去除異味;可以在內(nèi)部放置活性炭吸附異味。
3、冰箱要定期除霜,以免設(shè)備無法制冷,一些冰箱具有自動(dòng)除霜功能,可以開啟該功能使用。
4、冰箱使用時(shí)發(fā)出滋滋異響,可能是壓縮機(jī)傳動(dòng)裝置損壞,需要更換元件。