LAMP技術(shù)在感染乙腦病毒致倦庫蚊混合樣本檢測中的應(yīng)用
關(guān)鍵詞：lamp 乙腦病毒 混合樣本
摘要：為建立媒介蚊蟲自然感染種群樣本攜帶病原體快速靈敏的檢測技術(shù),本研究將實(shí)驗(yàn)室經(jīng)口感染乙腦病毒的致倦庫蚊陽性樣品和未感染乙腦病毒的陰性樣品按一定比例混合成混合樣本,分別采用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,qPCR)檢測方法,對感染乙腦病毒的致倦庫蚊混合樣本進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示:當(dāng)陽性樣本在混合樣本中所占比例為0.01%時(shí),LAMP仍然可檢測到病原體;定量PCR的最低檢出比例是陽性樣本在混合樣本中所占0.14%以上。通過進(jìn)一步優(yōu)化反應(yīng)體系各組分的濃度、反應(yīng)時(shí)間和溫度,建立了靈敏性高的LAMP擴(kuò)增方法。
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