乙醇誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡模型的建立
關(guān)鍵詞：乙醇 酒精性肝病 肝星狀細(xì)胞 凋亡 凋亡相關(guān)基因
摘要：目的：探討乙醇誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell，HSC）凋亡模型的作用及其與凋亡相關(guān)基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表達(dá)的關(guān)系。方法：用CCK-8法檢測(cè)不同濃度（0、10、20、40、60 和80 mL / L）的乙醇對(duì)HSC的殺傷作用。采用40 mL / L乙醇作用6 h誘導(dǎo)HSC細(xì)胞凋亡。通過流式細(xì)胞術(shù)分析乙醇誘導(dǎo)對(duì)凋亡的影響，并用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)乙醇誘導(dǎo)對(duì)凋亡相關(guān)基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表達(dá)的影響。結(jié)果：隨著乙醇濃度的增加，對(duì)HSC的殺傷能力逐漸增加。40 mL/ L乙醇使HSC發(fā)生顯著的細(xì)胞凋亡變化。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)乙醇誘導(dǎo)可使HSC早期＋晚期凋亡明顯增加（8.76% ± 0.43% vs 11.51% ± 0.54%），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = 2.11，P 〈 0.05）；促凋亡基因caspas-3、bax和p53的mRNA表達(dá)水平上調(diào)，抑制凋亡基因bcl-2的mRNA 表達(dá)水平下調(diào)。結(jié)論：低濃度乙醇可誘導(dǎo)HSC凋亡增加，其凋亡發(fā)生與凋亡相關(guān)基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表達(dá)改變相關(guān)。
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