K亞群禽白血病病毒多克隆檢測抗體的制備和特性分析
王呈呈; 冉英; 肖雅之; 李涵; 胡衛(wèi)國; 邱建華; 李宏梅; 郭慧君 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院; 山東省動物生物工程與疾病防治重點實驗室; 山東泰安271018
關(guān)鍵詞：k亞群禽白血病病毒 gp85基因 多克隆抗體
摘要：為制備識別K亞群禽白血病病毒(ALV-K)兔源多克隆抗體,將含ALV-K gp85基因的表達質(zhì)粒在大腸桿菌體內(nèi)進行誘導(dǎo)表達,獲得含his標(biāo)簽的大小為55KD的重組蛋白;將純化后的表達蛋白免疫接種5只青年兔,三次加強免疫后檢測收獲血清抗體,ELISA檢測血清抗體效價;對血清抗體進行純化并檢測抗體亞型,Western-blot和IFA檢測抗體對ALV-Kgp85蛋白和病毒識別特性。結(jié)果表明,獲得的抗體效價達到8×107,抗體亞型為IgG2b,該抗體能夠特異性識別ALV-K gp85蛋白和DF1細胞中的ALVK病毒,可以用于IFA臨床檢測,為K亞群禽白血病的快速檢測奠定了基礎(chǔ)。
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