Sirtuin在低氧誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖中的作用
關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 低氧 增殖 sirtuin
摘要：目的 探討低氧對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（h UC-MSCs）中Sirtuin（SIRT）蛋白表達(dá)影響及與細(xì)胞增殖的關(guān)系。方法 組織塊貼壁法分離和培養(yǎng)h UC-MSCs;流式細(xì)胞儀鑒定細(xì)胞表面標(biāo)志物;CCK-8法測(cè)定低氧與常氧下不同時(shí)間點(diǎn)h UC-MSCs的增殖能力;流式細(xì)胞儀檢測(cè)低氧與常氧下細(xì)胞周期的變化;免疫熒光與Western blotting測(cè)定低氧與常氧下細(xì)胞SIRT蛋白定位與表達(dá)。結(jié)果 成功分離h UC-MSCs;細(xì)胞CD90、CD105、CD29、CD44高表達(dá),CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DR無表達(dá);CCK-8測(cè)定低氧培養(yǎng)24、48、72 h細(xì)胞的增殖能力均高于常氧培養(yǎng)（P均〈0.05）;在低氧下培養(yǎng)24、48 h后S期細(xì)胞比率高于常氧培養(yǎng)（P均〈0.05）;免疫熒光檢測(cè)SIRT1、6位于細(xì)胞核內(nèi),SIRT2定位于胞漿,SIRT3、4、5定位于線粒體。Western blotting測(cè)定SIRT1在低氧培養(yǎng)24、48 h蛋白表達(dá)量均高于常氧條件（P均〈0.05）,常氧培養(yǎng)72 h的SIRT1表達(dá)量高于24 h及48 h（P均〈0.05）;SIRT2表達(dá)量在低氧培養(yǎng)24 h高于常氧培養(yǎng)（P〈0.05）,48 h后低于常氧培養(yǎng),72 h后高于常氧培養(yǎng)（P〈0.05）;低氧培養(yǎng)24、48、72 h后SIRT5的表達(dá)量均高于常氧處理（P均〈0.05）,常氧與低氧培養(yǎng)細(xì)胞48 h和72 h后均高于24 h時(shí)SIRT5的表達(dá)（P均〈0.05）。結(jié)論 低氧處理24、48、72 h均可以促進(jìn)h UC-MSCs的增殖。低氧誘導(dǎo)SIRT1、2與5表達(dá)改變提示SIRT1、2、5可能參與了低氧對(duì)h UC-MSCs增殖的調(diào)控。
山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)雜志要求:
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