貽貝足絲蛋白的汞、鎘抗性及富集機(jī)制
關(guān)鍵詞：基因工程 翡翠貽貝 足絲蛋白 基因克隆 轉(zhuǎn)錄組學(xué)
摘要：為探究貽貝足絲蛋白黏附重金屬的機(jī)理及分子機(jī)制,對(duì)翡翠貽貝足絲蛋白進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析,使用Trinity軟件從頭組裝,獲得73 571個(gè)UniGenes.翡翠貽貝足部的UniGenes注釋到基因本體(gene ontology,GO)數(shù)據(jù)庫(kù),共獲得9 466個(gè)注釋結(jié)果,通過(guò)基因組百科全書(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)數(shù)據(jù)庫(kù)注釋后,發(fā)現(xiàn)有955個(gè)UniGenes被注釋到關(guān)于黏著斑蛋白的通路中,推測(cè)足絲蛋白吸附重金屬的功能與其密切相關(guān).由于Pvfp6半胱氨酸、組氨酸和酪氨酸含量高,該蛋白可能對(duì)重金屬有結(jié)合作用。將 pvfp6 基因克隆到pET-30a表達(dá)載體,轉(zhuǎn)到大腸桿菌BL21 (DE3)表達(dá)。結(jié)果表明,含有pET-30a-pvfp6 質(zhì)粒的宿主具有一定的抗汞和抗鎘能力,能分別在含Hg^2+質(zhì)量濃度為5mg/L,或者含Cd^2+質(zhì)量濃度為160 mg/L的培養(yǎng)基中生長(zhǎng);重組菌對(duì)Hg^2+和Cd^2+的平衡富集量均高于對(duì)照組pET-30a,分別為109.89 mg/g和19.27mg/g.研究表明,足絲蛋白Pvfp6賦予了重組菌具有一定的抗汞和抗鎘的能力,且富集能力增強(qiáng).該研究可為海洋環(huán)境中重金屬污染的生物治理奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
深圳大學(xué)學(xué)報(bào)·人文社會(huì)科學(xué)版雜志要求:
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