構(gòu)建表達(dá)Flag-GPI的重組乙型肝炎病毒載體
關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒 5c3c 糖基磷脂酰肌醇 重組乙型肝炎病毒載體
摘要：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能夠特異性地感染人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。HBV的易感性可以歸于多個方面,包括細(xì)胞表面的受體以及細(xì)胞內(nèi)的蛋白或其他因子,目前對HBV易感性的了解還有待深入。本課題利用課題組原有的HBV 5c3c載體和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,構(gòu)建了重組HBV載體5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞后可以將Flag標(biāo)簽錨定在細(xì)胞膜上,且可利用Flag抗體通過流式細(xì)胞術(shù)對其進(jìn)行分選。在回補(bǔ)HBV包膜蛋白的情況下,5c3cT-Flag-GPI能包裝形成完整的重組HBV顆粒。本研究為后續(xù)優(yōu)化重組HBV的包裝效率,進(jìn)而為HBV易感性研究提供工具并奠定基礎(chǔ)。
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