受miRNA-205調(diào)控的重組柯薩奇病毒B3的構(gòu)建及其復(fù)制
關(guān)鍵詞：柯薩奇病毒b3 感染性克隆載體 細(xì)胞趨性
摘要：本研究在柯薩奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)基因組P1編碼區(qū)與P2編碼區(qū)之間插入一段has-miRNA-205-3p和has-miRNA-205-5p(簡(jiǎn)稱miR-205)的靶序列,得到重組病毒v205T,并比較分析了它在人宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞(miR-205低水平表達(dá))和非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞(miR-205高水平表達(dá))中的復(fù)制情況。結(jié)果表明,插入的miR-205靶序列不影響病毒在HeLa細(xì)胞中的復(fù)制水平,但抑制了病毒在A549細(xì)胞中的復(fù)制,病毒滴度為對(duì)照的1%以下。為探討v205T在2株細(xì)胞中復(fù)制差異的原因,進(jìn)一步加入miR-205的類似物和抑制物。miR-205類似物可抑制v205T在HeLa細(xì)胞中復(fù)制和殺傷細(xì)胞的水平,而miR-205抑制物可提高v205T在A549細(xì)胞中的復(fù)制和殺傷細(xì)胞的水平。結(jié)果表明,v205T的復(fù)制確實(shí)受miR-205的調(diào)控。本研究為開發(fā)基于CVB3載體的溶瘤病毒和針對(duì)CVB3的減毒活疫苗提供了依據(jù)。
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