根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)山葡萄VaCBF3基因轉(zhuǎn)化歐美楊111的研究
關(guān)鍵詞：歐美楊111 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法 遺傳轉(zhuǎn)化 山葡萄 cbf3基因
摘要：以歐美楊111為受體材料,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法進(jìn)行了山葡萄VaCBF3基因的遺傳轉(zhuǎn)化,分析了預(yù)培養(yǎng)時間、菌液濃度、侵染時間、共培養(yǎng)時間對轉(zhuǎn)化效率的影響,并對獲得抗性植株進(jìn)行PCR檢測。結(jié)果表明:歐美楊111遺傳轉(zhuǎn)化過程中適宜的預(yù)培養(yǎng)時間為3 d,適宜菌液濃度為OD600為0.3~0.4,適宜侵染時間為2~4 min,適宜共培養(yǎng)時間為3 d。經(jīng)過對轉(zhuǎn)化子的PCR鑒定,獲得4株陽性轉(zhuǎn)基因植株,初步說明外源山葡萄CBF3基因已導(dǎo)入至歐美楊111號中,轉(zhuǎn)化體系已成功建立。
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