Renalase對腎小管上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化影響的研究
關(guān)鍵詞：renalase 上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化 腎臟纖維化erk信號通路
摘要：目的本研究旨在探討Renalase是否可以延緩。腎臟纖維化。方法體外培養(yǎng)人近端。腎小管上皮細(xì)胞，給予TGF-β1和（或）不同濃度的Renalase與細(xì)胞共同孵育，觀察細(xì)胞形態(tài)的變化，應(yīng)用免疫熒光觀察E-cadherin、α-SMA的分布和表達(dá)情況；應(yīng)用Westernblot（WB）法和RT-PCR檢測細(xì)胞中E-cadherin、α-SMA的蛋白和mRNA表達(dá)，應(yīng)用WB檢測FN和Col-I蛋白表達(dá)，并檢測細(xì)胞內(nèi)信號分子P-Smad-2／3、P-ERK1／2、P-p38水平的變化，探討其可能的分子生物學(xué)機(jī)制。結(jié)果給予TGF-β1刺激后，E-cadherin表達(dá)下調(diào)、α-SMA、FN、Col-I表達(dá)增加。應(yīng)用不同濃度Renalase與TGF-p1共孵育細(xì)胞，上述現(xiàn)象改善，且呈劑量依賴性。同時，與單獨TGF-β1刺激相比，添加Renalase共孵育后，細(xì)胞內(nèi)P-smad2／3和P-p38表達(dá)無明顯變化，但P-ERK1／2表達(dá)明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。而應(yīng)用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染過表達(dá)ERK信號通路后，Renalase抑制TGF-β1誘導(dǎo)的EMT和纖維化的作用被抵消。結(jié)論本研究首次證實Renalase可以減輕TGF-B1所致的腎小管上皮細(xì)胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化和纖維化，其機(jī)制可能與抑制ERK1／2信號通路的激活相關(guān)，為臨床延緩CKD進(jìn)展提供新的治療靶點和理論依據(jù)。
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