RNA干擾PDGF-B基因?qū)δz質(zhì)瘤U251細(xì)胞凋亡和增殖的影響
關(guān)鍵詞：u251膠質(zhì)瘤細(xì)胞 血小板源生長(zhǎng)因子 rna干擾
摘要：目的利用RNA干擾（RNA interference,RNAi）技術(shù)特定沉默膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞株的血小板源生長(zhǎng)因子-B（PDGF-B）基因,觀察其對(duì)U251細(xì)胞株細(xì)胞凋亡和增殖的影響。方法利用脂質(zhì)體將針對(duì)PDGF-B基因的siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入U(xiǎn)251細(xì)胞,利用實(shí)時(shí)熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RTPCR）檢測(cè)PDGF-B基因表達(dá);Western blot檢測(cè)顯示siRNA轉(zhuǎn)染組PDGF-B蛋白表達(dá),采用MTT法檢測(cè)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的增殖,應(yīng)用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)觀察抑制PDGF-B基因后膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果 RT-PCR檢測(cè)PDGF-B基因表達(dá)明顯下降;Western blot檢測(cè)顯示siRNA轉(zhuǎn)染組PDGF-B蛋白表達(dá)明顯抑制（抑制率〉60%）,MTT結(jié)果顯示siRNA轉(zhuǎn)染組U251細(xì)胞增殖較對(duì)照組明顯降低;流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)提示降低PDGF-B在膠質(zhì)瘤細(xì)胞的表達(dá)能抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的有絲分裂,促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。結(jié)論構(gòu)建針對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞PDGF-B的RNA干擾質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞株后,可明顯抑制U251細(xì)胞株P(guān)DGF的表達(dá),對(duì)人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞株有明顯的生長(zhǎng)抑制和促進(jìn)凋亡作用。
中華神經(jīng)外科疾病研究雜志要求:
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