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雷公藤甲素對IgA腎病患者外周血單個核細(xì)胞炎性反應(yīng)及凋亡的影響

王暢 梁倩 彭佑銘 劉虹 孫林 尹文清 凌光輝 劉伏友 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院腎內(nèi)科湖南省腎臟疾病及血液凈化重點實驗室 長沙410011

關(guān)鍵詞:腎小球腎炎 iga 雷公藤內(nèi)酯 細(xì)胞凋亡 外周血單個核細(xì)胞 

摘要:目的探討IgA腎?。↖gAN)患者外周血單個核細(xì)胞(PBMC)炎性因子分泌及自身凋亡狀態(tài),以及雷公藤甲素(TP)對其調(diào)節(jié)的相關(guān)機制。方法取IgAN患者(n=29)及健康人(/I=16)外周血,分別通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)和硝酸還原酶法(Griess法)檢測血漿腫瘤壞死因子儀(TNF.儀)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和一氧化氮(No)表達(dá)情況。體外培養(yǎng)IgAN患者PBMC,以不同濃度TP刺激PMBC,四唑鹽比色間接法(MTY)檢測TP對細(xì)胞生長的抑制效應(yīng)。根據(jù)MTF結(jié)果,分別分為IgAN患者PBMC組、植物血球凝集素(PHA,10mg/L,促細(xì)胞分裂原)模型組和PHA(10mg/L)±TP(12.5μg,L、25μg/L)處理組。ELISA法檢測上清液中TNF。儀、IL-6的分泌情況;Griess法檢測上清液中NO含量;流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率;RT-PCR法、Western印跡法檢測PBMC中B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)、半胱天冬蛋白酶(caspase)-9、caspase-3基因和蛋白表達(dá)變化。結(jié)果IgAN患者血漿TNF-α(131.57±50.61)ng/L比(30.24±18.93)ng/L,P〈0.01],IL-6[(76.36±25.21)ng/L比(35.08±16.59)ng/L,P〈0.01]和NO[(46.36±12.93)μmol/L比(26.61±10.87)μmol/L,P〈0.011均顯著高于健康人,PBMC凋亡率亦顯著高于健康人[(16.88±5.66)%比(8.67±3.87)%,P〈0.011。TP可抑制IgAN患者PBMC分泌TNF-α、IL-6和NO,誘導(dǎo)其凋亡;也可抑制Bcl-2表達(dá),增加Bax、caspase.9、caspase-3表達(dá)。結(jié)論IgAN患者體內(nèi)PBMC處于高度活化狀態(tài),并且凋亡率增高。TP能有效抑制IgAN患者PBMC的炎性活化狀態(tài),并可能通過線粒體途徑改變Bcl-2蛋白家族抗凋亡因子和促凋亡因子平衡而誘導(dǎo)IgAN患者PBMC凋亡。

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